【摘 要】
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根据GenBank发表序列（AY052417）设计引物，以烟夜蛾（Helicoverpa assulta Guenée）滞育蛹为材料，利用RT-PCR技术从中扩增到滞育激素（diapause hormone, DH）基因cDNA。PCR产物经Nde Ⅰ/EcoR Ⅰ双酶切后，与同样双酶切的pET-30a（+）质粒连接并转化至大肠杆菌（Escherichia coli）BL21中，经检测筛选，成功得
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根据GenBank发表序列（AY052417）设计引物，以烟夜蛾（Helicoverpa assulta Guenée）滞育蛹为材料，利用RT-PCR技术从中扩增到滞育激素（diapause hormone, DH）基因cDNA。PCR产物经Nde Ⅰ/EcoR Ⅰ双酶切后，与同样双酶切的pET-30a（+）质粒连接并转化至大肠杆菌（Escherichia coli）BL21中，经检测筛选，成功得到阳性克隆。测序结果表明，重组载体的插入片段中含有DH、性信息素生物合成激活肽（pheromone biosynthesis activating neuropeptide，PBAN）及三个食道下神经节肽（suboesophageal ganglion neuropeptide，SGNP）的完整的编码序列，且其阅读框架（reading frame）完全正确。 筛选得到的pDH/BL21菌株利用IPTG诱导培养后，经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测发现，该菌株表达有一大小约21kDa的外源蛋白。根据重组质粒的测序结果推测，该重组蛋白由182个氨基酸组成，在其N-端融合有His·Tag纯化标记，这为下一步该蛋白的分离纯化提供了便利的方法。 本研究首次将DH基因整合入原核表达载体中表达，为大量获取DH重组蛋白，研究DH的结构及功能奠定了基础。
其他文献
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目的通过借助Mimics软件构筑L4/5节段LDH模型,进行术前虚拟演示TESSYS术式并设计穿刺方案,测量穿刺路径相关数据,进而指导施术过程。旨在探讨该软件对TESSYS技术治疗L4/5节段LDH的指导意义,以期为临床施术设计操作范式、提高穿刺效率、降低射线损伤、预防手术并发症、减缓陡峭的学习曲线等提供可行性方法。方法筛选出郑州市骨科医院微创脊柱科在2018年12月～2019年09月收治的行TE
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目的:本课题通过观察涤痰安神汤治疗痰热内扰型失眠的临床疗效,评估其治疗失眠的临床使用价值及用药安全性,为治疗痰热内扰型失眠提供临床依据。方法:将收集的76例符合试验标准的痰热内扰型失眠患者随机分为两组,对照组予右佐匹克隆片口服治疗,治疗组在对照组基础上加服涤痰安神汤,两组治疗周期均为3周,采用自身前后对照、组间对照的研究方法,观察两组治疗前后的中医证候积分、匹兹堡睡眠质量指数积分（PSQI）、失眠
目的:统计分析泌尿系结石患者的中医体质构成倾向,探寻对本病各项主要临床指标产生统计学影响的有关体质,通过设计对应的体质调理方案,为防治本病、降低复发提供依据与思路。方法:研究对象为2017年11月1日至2019年11月1日于河南省中医院肾病科治疗的泌尿系结石患者,研究本病患者中医体质的总体构成及其与一般资料、证候、临床指征的相关性,结果以P<0.05时具有统计学意义,基于卡方统计的Phi系数（Φ）
目的:观察行气化痰方联合“吉西他滨+顺铂”（GP）方案治疗中晚期非小细胞肺鳞癌的临床疗效,评价其对中医证候、生活质量、KPS评分、肿瘤标志物、毒副反应方面的影响,为行气化痰方的推广应用提供临床依据。方法:采用前瞻性、随机对照方法进行临床研究,病例来源于2018年12月～2020年01月在河南省中医院肿瘤科、河南省肿瘤医院治疗的肺鳞癌患者,将符合标准的64例患者随机分为试验组和对照组。主要观察中医证
目的:本课题通过观察清热化湿调糖饮对2型糖尿病（T2DM）湿热内蕴证患者临床症状及相关实验室指标的影响,探讨其临床疗效及安全性。方法:本课题采用随机对照的研究设计方案,选取符合纳入标准的T2DM湿热内蕴证患者66例,随机分为治疗组33例和对照组33例。两组患者均给予饮食、运动等基础治疗,治疗组给予清热化湿调糖饮（颗粒剂无糖型）,对照组给予盐酸二甲双胍片（格华止）,疗程均为12周。对治疗前后两组患者
抗菌肽广泛存在于多种生物体内,具有广谱抗菌、调节免疫、抑制肿瘤等多种生物学功能。抗菌肽在禽类体内表达的主要是β-防御素,本试验主要针对非洲鸵鸟主要免疫器官β-防御素基因的克隆、序列分析、抗菌活性进行了研究,并与固始鸡主要免疫器官β-防御素基因进行比较分析。1.参照GenBank已公布的鸡β-防御素基因Gal-2（NM20440992）,根据PCR引物的设计原则并借助分子生物学软件primer5.0
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近年来大量的微细观实验研究表明,当材料的变形特征尺寸在微米或亚微米量级时,其力学行为与材料的内秉特征长度相关,体现出强烈的尺度效应。经典连续介质力学的本构关系不包含任何材料内秉特征长度,不能预测材料的尺寸效应。为了解释尺度效应现象,Fleck和Hutchinson等学者发展了应变梯度偶应力理论,该理论成功地解释了微扭转和微弯曲过程中的尺度效应现象。由于该理论引入了位移的二阶导数和相应的高阶边界条件