论文部分内容阅读
T-2毒素是一种真菌霉菌毒素,天然存在于镰刀菌属的霉菌副产品中。由于高温、高湿、季风、非季节性降雨和收割期间的洪水,T-2毒素污染了广大地区种植的谷物。以分离的物种中特异性的谷类病原体的生物合成途径产生的单端孢菌毒素真菌毒素包括T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、雪腐镰刀菌醇和二乙酰氧基丙烯醇。T-2毒素可污染大量饲料,如大麦、高粱、玉米蛋白饲料、玉米蛋白粉、玉米和麸皮。T-2毒素与个体健康损伤密切相关。单端孢菌素对真核细胞具多种抑制作用,如抑制蛋白质合成、RNA和DNA合成、阻碍线粒体功能、影响细胞分裂和增殖和损害细胞膜完整性。此外,T-2毒素还能够诱导细胞凋亡和程序性细胞死亡。受T-2毒素污染饲料对畜牧场畜禽的主要毒性作用包括拒食、呕吐、生长迟缓、饮食中毒性白血病（ATA）、肠胃炎、免疫妥协、卵巢功能减退和生殖障碍等。大量最新科学文献报道,T-2毒素诱导的毒性取决于途径、剂量和暴露持续时间,T-2毒素已经在多种动物上进行了基于体外或体内研究,以前的研究已经报道了 T-2毒素对怀孕小鼠、胚胎和胎儿的影响,但是研究T-2毒素在妊娠后期和整个哺乳期暴露对母体及其从出生到断奶的下一代表现的影响还鲜有研究,因此,本研究首次从妊娠后期（GD 14）直至整个哺乳期（LD 21）进行T-2毒素暴露,研究T-2毒素对母鼠及其仔鼠的影响,以探索对后代的潜在毒性作用。1.妊娠后期和哺乳期小鼠暴露T-2毒素对母鼠肝脏氧化损伤和早期乳腺腺泡退化的影响本试验旨在评估T-2毒素对妊娠后期和整个哺乳期的毒性作用。总共将30只ICR妊娠小鼠平均分成3组（n=10/组）,分别为0 mg/kg（对照组）、0.005 mg/kg（低剂量组）和0.05 mg/kg（高剂量组）。妊娠期和哺乳期暴露T-2毒素的怀孕小鼠每天通过强饲0、0.005和0.05mg/kg（BW）的T-2毒素,用于诱导T-2毒素对母鼠的发育毒性,从妊娠第14天（GD 14）开始至哺乳第21天（LD 21）时结束。该研究结果表明,T-2毒素显著降低母鼠的采食量和体重;在哺乳期第21天（LD 21）解剖,处理组和对照组之间绝对和相对体重和相对器官重量均显著降低。T-2毒素诱导自由基的产生,此外增加了血清和肝脏中的脂质过氧化生物标志物,丙二醛（MDA）的水平,降低量血清和肝脏中抗氧化酶如过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和降低血清和肝脏的总抗氧化能力（T-AOC）。T-2毒素导致了超氧化物歧化酶（SOD）减少,进而导致肝脏代谢酶水平升高,例如谷氨酸草酰乙酸转氨酶（GOT）和谷氨酸丙酮酸转氨酶（GPT）的增加。肝脏的组织形态学观察发现明显细胞损伤和细胞凋亡,脾脏出现大面积的组织细胞凋亡,肾脏则表现出大面积的上皮细胞坏死和透明质的形成,出现乳腺腺泡的早期退化。这些结果表明,妊娠后期和哺乳期暴露T-2毒素对母鼠采食量和体重具有明显毒性,导致乳腺腺泡的早期退化,进而可能会减少产奶量。2.母体暴露T-2毒素对雄性和雌性小鼠后代生长和发育的影响在本试验中,将30只怀孕的小鼠随机分成三组（n=10/组）。从妊娠后期（GD14）直至哺乳期结束（LD21）,以0、0.005和0.05mg/kg（BW）的剂量口服给予小鼠T-2毒素。从每组中随机选择雄性（n=5/组）和雌性（n=5/组）小鼠后代,并在出生后第1、7、21、28和56天的五个不同时间点实施安乐死。出生后第21天后（断奶）每周记录采食量和体重。在母体暴露T-2毒素处理的小鼠后代中,体重和采食量显著降低。在每个采集时间点,T-2毒素都降低了雄性和雌性后代的绝对和相对器官重。此外,它通过增加血清和肝脏中脂质过氧化生物标志物丙二醛（MDA）的水平,降低血清和肝脏中抗氧化酶如过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）,最终降低血清和肝脏总抗氧化能力（T-AOC）来诱导自由基的产生,肝脏中的代谢酶,谷氨酸草酰乙酸转氨酶（GOT）和谷氨酸丙酮酸转氨酶（GPT）增加。组织形态学检查发现,在肝脏中,出现明显的细胞凋亡,肾脏表现出间质纤维化管状变性,脾脏出现凋亡的细胞。血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）也显著下降,这可能导致体细胞生长、骨骼生长和器官发育的降低,这与雄性后代体重和体长在显著降低一致。试验结果表明,妊娠后期和哺乳期暴露T-2毒素会延迟雄性小鼠后代的生长和发育。3.母体暴露T-2毒素对雌性仔鼠初情期启动和发情周期的影响从妊娠第14天（GD 14）到哺乳第21天（LD 21）,用每天0、0.005和0.05mg/kg（BW）的T-2毒素处理母鼠。在断奶时,从每组随机选择雌性后代（n=5/组）,以作后续研究。该试验的结果表明,与对照组相比,T-2毒素暴露导致雌性后代绝对体重和相对体重显著降低,此外,它还影响生殖器官,如子宫和卵巢的长度、宽度和重量的下降。在T-2毒素处理组中,阴道张开时间显著增加。第一次发情期显著延迟,体重增加明显减少。连续测量三次发情周期的长度,发现第一次发情和正常的发情周期延迟,发情期延长。后代雌鼠在早期发育期间,受T-2毒素暴露,在这期间,后代血清中雌激素（E2）、黄体酮（P4）、促黄体激素（LH）和卵泡刺激素（FSH）的浓度显著降低。T-2毒素诱导自由基产生,增加血清和卵巢中脂质过氧化生物标志物,丙二醛（MDA）,降低血清和卵巢中过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶和降低血清和卵巢中总抗氧化能力（T-AOC）。基因水平我们检测了下丘脑中的GnRH、垂体中的GnRHR、LH和FSH以及卵巢中的FSHR和LHR的mRNA水平。与对照相比,下丘脑中的GnRH以及垂体中GnRHR,LH和FSH的mRNA水平降低;卵巢FSHR和LHR的mRNA水平显著降低。T-2毒素诱导了氧化损伤并降低血清中类固醇、雌激素和孕酮水平,损伤对平衡阴道环境具有重要作用的保护性角质化上皮层,使阴道上皮恶化。试验结果表明,早期暴露于T-2毒素会延迟雌鼠成熟并诱导卵巢损伤。