基于谱效分析的岗梅根、茎比较研究

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目的:对岗梅根、茎在指纹图谱、药效方面进行比较研究,并结合谱效关系分析,评价岗梅根、茎抗氧化药效成分的异同,进一步研究茎是否能代替根入药。方法:1.岗梅根、茎指纹图谱对比研究使用正丁醇萃取,并以岗梅三萜皂苷类单体成分为对照,采用薄层色谱法,比较岗梅根、茎中三萜皂苷类成分的异同;以甲醇提取,采用高效液相色谱法,对岗梅根、茎化学成分进行比较。2.岗梅根、茎药效比较研究2.1岗梅根茎体外抗氧化作用比较研究分别测定总还原能力、羟基自由基清除能力、超氧阴离子清除能力,比较岗梅根、茎提取物的体外抗氧化作用。2.2岗梅根、茎对氨气致小鼠急性气道炎症的作用使昆明种小鼠吸入氨气,建急性气道炎症模型,随后给予岗梅根、茎提取物治疗,测定其肺指数,比较根茎药效异同。2.3岗梅根茎对脂多糖致小鼠咽炎作用比较研究通过咽部注射脂多糖溶液,建立小鼠咽炎模型,并给予岗梅根、茎提取物治疗。制作病理切片观察其咽部病理状况,同时测定血清一氧化氮、丙二醛含量,比较根、茎体内抗氧化药效异同。3.岗梅根、茎综合比较评价结合指纹图谱、药理药效实验结果,采用多种相关性分析工具(如偏最小二乘法回归、皮尔逊相关、灰色关联度分析),进行谱效关系分析,综合比较评价岗梅根、茎的异同。结果:1.岗梅根、茎指纹图谱研究1.1.岗梅薄层指纹图谱薄层图谱结果表明,各产地岗梅根、茎之间斑点数目和颜色相近,提示两者所含三萜皂苷类成分相似。1.2.岗梅根茎高效液相指纹图谱用于制备供试品的岗梅根、茎采自于同一植株,通过比较色谱图可得,根、茎中成分存在一定的差异。在5-145min保留时间范围内,岗梅根指纹图谱共有16个特征峰;岗梅茎指纹图谱共有18个特征峰;其中根、茎共有的特征峰数为12个。根独有的峰标记为"GA~GD";茎独有的峰标记为"JA~JF";根、茎共有的峰标记为“P1-P12”。其共有成分含量不等。2.岗梅根、茎药效比较研究2.1岗梅根茎体外抗氧化作用比较研究两者均有较强的还原能力及清除羟基自由基能力,岗梅茎的还原能力显著优于岗梅根(P<0.01)。在药液浓度相同的情况下(5mg生药/mL),同一植株的岗梅茎总还原能力显著高于岗梅根,茎的药效为根的1.53-4.43倍,经代入线性公式计算,当根药液浓度增大1.62~5.99倍时,药效与同一植株的茎相等。2.2岗梅根、茎对氨气致小鼠急性气道炎症的作用经氨气刺激后,小鼠肺指数有所上升,与正常对照组比较有显著差异(P<0.01)。经过给予岗梅根、茎醇提物治疗,各给药组能不同程度的降低肺指数(P<0.05)。等生药量的岗梅根、茎给药组间药效无显著差异;等皂苷量的纯化根、茎总皂苷给药组间药效无显著差异。2.3岗梅根茎对脂多糖致小鼠咽炎作用比较研究于小鼠咽部注射脂多糖溶液可成功制作咽炎模型,各指标与正常对照组比较有显著差异(P<0.01)。经过给予岗梅根、茎醇提物治疗,能不同程度减轻咽炎病理症状,对咽炎小鼠血清中一氧化氮、丙二醛含量的升高有显著抑制作用,同一植株的岗梅根、茎药效无显著差异(P>0.05)。3.岗梅根、茎综合比较评价岗梅根、茎的药理作用是其化学成分群共同作用的结果,两者发挥作用的化学成分不尽相同。综合各分析方法,岗梅根中的体外抗氧化药效成分主要为P5、P9、GB、 P6、P10,而岗梅茎中则主要为JA、P5、P6、P9、P2、P4、P10、JC。其中根、茎共有的峰为P5、P6、P9、P10。根中P2、P4与药效关联性相对较小,故未选取。其中茎中P5、P9的峰面积显著大于根中的P5、P9,推测其所代表成分的含量较根多,为茎还原能力显著优于根的原因之一。岗梅根中抑制一氧化氮、丙二醛的药效成分主要为GA、P1、P4、P12,而岗梅茎中则主要为P2、P4、P9、P10、P12、JD、JE、JF,提示岗梅根、茎体内抗氧化的药效物质不完全一致。结论:岗梅根、茎化学成分种类及含量有差异。在药效方面,茎在体外的还原能力显著高于根,但等生药量的根、茎抗气道炎、抗咽炎药效无统计学差异。结合谱效分析,两者的药效物质不完全一致,岗梅茎中具有较多的抗氧化能力强的成分。茎中皂苷含量较根少,推测其通过抑制氧化应激反应,从而达到与根相同的抗炎药效。
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