包皮环切术降低男性HIV感染率机制的初步研究

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背景:在非洲的三项大样本流行病学调查(乌干达、肯尼亚、南非)已经证实:包皮环切术后,男性的HIV感染率明显降低。因此WHO宣布包皮环切术降低60%的HIV感染率。但是其机理一直不清。在临床中,包皮内板比包皮外板更容易破损,包茎患者包皮狭窄环处的包皮内板尤其容易破损。为此,我们采用生物力学和病理检测相结合,以期探讨包皮内板和包皮外板的强度差异。目的:1.在纵向、横向及垂直方向分别测量成人包皮内板、外板复合组织的极限抗拉强度和剪切力,从生物力学角度寻找包皮内板容易破损的机制。2.从角质层屏障角度探讨包皮环切术降低HIV感染率的机制。比较包皮内板和外板角质层厚度,并与阴茎其他部位的角质层厚度比较。比较包皮、口腔粘膜、阴道粘膜、小阴唇内侧皮肤等性行为中容易摩擦部位的角质层厚度。3.比较上述这些组织的上皮层厚度、上皮细胞层数,查看角质层厚度与上皮层有无关系。方法:包皮组织均采自北京大学第一医院男科中心门诊行包皮环切手术的44位成年男性患者。患者年龄15~54岁,平均年龄26.9±6.8岁。(1).将矩形试件(包皮复合组织切成横行、纵行)固定在试验机的夹具上,以相同的加载速度10mm/min拉长试件直至完全断裂。计算横向、纵向的载荷强度和刚度。(2).将正方形包皮复合组织试件固定在试验机的夹具上,压头以相同的加载速度10mm/min向下方移动,直至试件破裂。计算剪切力和位移。10%福尔马林固定切取的包皮组织3d。以包皮内、外板交界处为标志,对称性切取包皮内板、包皮外板的横行、纵行标本。HE染色后,测量上皮角质层厚度,随机选取4例包皮做免疫组化方式来验证。用HE染色并比较包皮、口腔粘膜、阴道粘膜、小阴唇内侧皮肤等性行为中容易摩擦部位的上皮层厚度、上皮细胞层数,查看角质层厚度与上皮层有无关系。结果:1.共检测22对新鲜包皮组织的纵向断裂负荷和位移,结果包皮内板复合组织为1.046±0.3367N,包皮外板复合组织为1.356±0.4345N(P(0.01)。包皮内板复合组织的位移为9.56±4.12mm,包皮外板复合组织为9.18±3.47mm(P>0.05)。2.共检测20对新鲜包皮组织的横向断裂负荷和位移,结果包皮内板复合组织横向极限抗牵拉强度为0.99±0.50N,包皮外板复合组织为1.75±0.55N(P<0.001)。包皮内板、外板复合组织的横向断裂位移分别为10.00±5.60mm、12.07±3.92mm(P>0.05)。3.共检测11对新鲜包皮组织的剪切力和位移,结果包皮内板复合组织的剪切力为0.79±0.25N,包皮外板复合组织为1.55±0.71N(P<0.01)。包皮内板和外板复合组织的位移为4.90±1.46mm、6.66±2.30mm(P<0.05)。4.7例纵向标本中,包皮内板(外板)角质层厚度为6.83±1.40μm、11.43±3.10μm(P<0.05)。5.12例横向包皮标本,包皮内板远端角质层厚度为7.04±3.08μm,比内板近端角质层薄(10.83±8.02,um,P<0.05),也比包皮外板远端(11.30±2.31μ.m,P<0.05)、外板近端角质层(12.63±2.51μm,P<0.05)薄。6.7例纵向包皮内板、外板的上皮层厚度分别为68.81±8.03μm、75.72±10.42um(P>0.05)。12例远端横向包皮内板、外板的上皮层厚度分别为93.92±26.33,μm、93.52gm±16.14um(P>0.05)。12例近端横向包皮内板、外板的上皮层厚度分别为107.80±28.67μm、87.12±14.76,μm(P>0.05)。10例口腔粘膜的上皮层厚度均值为270.1±668.4μm,比包皮内板、外板厚(P<0.05)。7例阴道粘膜的上皮层厚度均值为185.7±79.0μm,比包皮内板、外板厚(P<0.05)。结论:1.包皮内板复合组织的韧性强度比包皮外板复合组织低。排除皮下组织的影响,可能包皮内板粘膜的韧性强度比包皮外板低。包皮内板、外板复合组织的韧性强度远低于腹部、胸部的正常皮肤。包皮内、外板组织的弹性无显著差异。2.包皮内板的角质层比包皮外板薄(P<0.05),而包皮外板的角质层/上皮细胞层数没有显著差异(P>0.05)。这对于包皮环切术有一定的指导意义,即切除较多的包皮内板,可能减少性生活时外力导致的局部损伤,而切除较多的包皮外板在减少局部损伤的意义可能不大。3.包皮内板、包皮外板的上皮层比口腔粘膜、阴道粘膜薄,可能更容易破损。目的:比较包皮内板和外板朗格汉斯细胞,并与阴茎其他部位比较;比较包皮、口腔粘膜、阴道粘膜、小阴唇内侧皮肤等性行为中容易摩擦部位的朗格汉斯细胞;从HIV靶细胞角度探讨包皮环切术降低HIV感染率的机制。方法:成年男性包皮标本10例,患者年龄18~45岁。3例包茎及4例慢性包皮炎症病例,采自中国医学科学院整形外科医院门诊手术室,年龄分别为33、32、62岁。阴茎标本1例,年龄为20岁。口腔粘膜标本12例,包括5例龈颊沟粘膜,3例颊粘膜,4例唇粘膜,年龄为25.5±7.5岁。阴道粘膜标本7例,年龄为39.1±10.5岁。所有患者均签署知情同意书。标本做朗格汉斯细胞染色,在光镜下分别计算包皮内板、包皮外板、阴茎标本、阴道粘膜、口腔粘膜、小阴唇皮肤的上皮层朗格汉斯细胞(以下简称LC细胞)计数及和上皮角质层的距离。结果:1.10例外观正常的包皮标本中,7例包皮内板的平均LC细胞密度为167.3±23.0个/mm2,10例包皮外板为65.1±20.7个/mm2(P<0.05)。4例有慢性炎症或者伴有局部破损的包皮内板为261.1±31.3个/mm2(P<0.05)。7例包皮内板的LC细胞平均距离上皮角质层的距离为25.60±5.11μm。10例包皮外板为35.35±6.16μm,经t检验(P<0.05)。7例包皮内板染色正常的标本中,其包皮外板LC细胞平均距离上皮角质层的距离为34.23±3.23μm(P<0.05)。2.6例阴道粘膜中,平均LC细胞密度为87.2±35.2个/mm2,LC细胞平均距离上皮角质层的距离为88.96±41.24μm。检测1例小阴唇,内侧面密度为52.8个/mm2,外侧面密度为37.2个/mm2。LC细胞平均距离上皮角质层的距离为91.94±34.47μm。3.11例口腔粘膜中,平均LC细胞密度为79.2±31.7个/mm2。LC细胞平均距离上皮角质层的距离为91.94±34.47μm。结论:1.包皮内板(167.3±23.0个/mm2)的LC密度比包皮外板(65.1±20.7个/mm2)、阴道粘膜(87.2±35.2个/mm2)、口腔粘膜(79.2±31.7个/mm2)高,P<0.05。2.包皮内板(25.60±5.11μm)的LC到上皮角质层的距离,比包皮外板(35.35±6.16μm)、阴道粘膜(88.96±41.24μm)、口腔粘膜(91.94±34.47μm)高,P<0.05。3.处于慢性炎症期间或伴有局部破损的包皮内板LC细胞密度(261.1±31.3个/mm2)明显高于正常组的包皮内板(167.3±23.0个/mm2)及包皮外板(65.1±20.7个/mm2),P<0.05。4.总结:包皮内板比其他组织的LC细胞多,距离上皮角质层更近,因此感染HIV病毒的概率相对较高。处于慢性炎症期间或伴有局部破损的包皮内板可能更容易感染HIV病毒。目的:旨在探索一种手术创伤小、切除组织量小、手术并发症小,且最大限度减低HIV感染率的包皮环切手术方式。方法:自2009年5月至2012年1月,中国医学科学院整形外科医院整形十科门诊及住院手术室共收治54例包皮过长及包茎患者,年龄5~62岁。对于单纯包皮过长患者,行包皮内板环切术;对于包茎患者,同时结合背侧及腹侧包皮纵行切开松解术。结果:1.1例患者出现阴茎背侧切口裂开,经换药后愈合,其余53例均成功。术后7天拆线,胶原蛋白线一般6~10天自行脱落。术后包皮无明显水肿、出血、血肿、切口感染等并发症。术后阴茎外形自然,系带完整保留,无系带感觉异常、切口瘢痕不明显。2.HE染色显示,切除的包皮内板组织平均厚度为354.5±88.2μm,与传统包皮环切术切除的组织厚度有显著差异。结论:对于包茎及包皮过长患者,应用包皮内板环切术切除的组织量少、创伤小、术后恢复快,且本术式最大限度地降低患者术后疼痛、包皮水肿等不适,因此适合推广。本术式在包皮环切术降低HIV感染率方面做出有益的探讨,但是最终的效果仍需要大样本随机对照试验来证实
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