论文部分内容阅读
2型糖尿病的发病机制包括胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能障碍。解偶联蛋白(UCP)作为线粒体内膜的质子载体,能将线粒体内膜外侧的H+运回内膜内侧,降低物质氧化过程中H+形成的膜两侧的电化学梯度,使氧化过程与ADP磷酸化过程解偶联,ATP生成减少,而以产热的形式释放能量。新近研究表明UCP-2通过解偶联机制影响β细胞分泌胰岛素的功能,UCP-2表达的增加可降低其分泌胰岛素的能力。UCP-2基因区域与T2DM和高胰岛素血症相关联,而其结构基因的变异似乎与T2DM无关。启动子对基因的表达至关重要,近来的研究发现UCP-2启动子部位的-866G/A多态性可能与T2DM的发生、发展有关,A/A基因型携带者的UCP表达高于G/G型携带者。目前没有有关国人的相关研究报道。目的 研究UCP-2启动子-866G/A多态性与大连地区2型糖尿病(T2DM)的关系。方法 选取已确诊的中国辽南地区汉族T2DM患者125例,男性60例,女性65例,平均年龄(61.4±13.3)岁,平均病程(6.98±4.7)年;非糖尿病者80例,男性50例,女性30例,平均年龄(60.4±10.1)岁,空腹血糖<6mmol/L,无其他内分泌疾病,无DM家族史。采集清晨空腹抗凝血,提取有核细胞基因组DNA ,根据UCP2启动子基因序列设计引物,用多聚酶链反应技术(PCR)扩增所需片段,片段长度<WP=5>369bp,然后用Mlu内切酶在37℃水浴箱中消化3小时,以1%琼脂糖电泳分离酶切产物,分出不同的基因型(GG, GA, AA)。比较T2DM组及非糖尿病组的基因型分布及频率,同时分析各基因型的胰岛功能,并将基因型和T2DM进行Logistic多元回归分析。血糖测定采用葡萄糖氧化酶法,血清胰岛素采用放射免疫测定法(RIA),C肽测定采用免疫放射活度法(IRMA)。结果 1.UCP-2 启动子-866G/A多态性在非糖尿病组的基因型分布频率分别为GG 47.5%,AG 35%,AA17.5%,G及A等位基因频率分别为65%,35%;2型糖尿病患者的基因型分布频率为GG 36%,GA 32.8%,AA 31.2%,G及A等位基因频率分别为52.4%,47.6%,与非糖尿病组相比, AA基因型频率及A等位基因频率明显增高((2=7.414,P=0.023及(2=6.331,P=0.014)。2.非糖尿病组各基因型平均C肽水平分别为GG 1.44±0.64 (mol/L、GA 1.86±1.37 (mol/L及AA 0.59±0.35 (mol/L。GA与GG组C肽值无显著性差异,P>0.05;AA与GA组比较,P<0.05;AA与GG组C肽值比较,P<0.05;AA组C肽水平明显小于GG/GA组。各组之间胰岛素水平无显著性差异 P>0.05,但随着GG到AA的基因型转变,胰岛素水平也具有下降趋势。3.糖尿病组各基因型胰岛功能比较:GG、GA、AA的平均C肽值分别为0.87±0.8 (mol/L 、0.91±0.71 (mol/L 、0.57±0.71(mol/L,各组间均无显著性差异,但AA组与GG/GA组比较仍有下降趋势,P=0.26。4.T2DM危险因子的Logistic多元回归分析结果表明,血总胆固醇、UCP-2 -866G/A基因多肽性及甘油三脂与糖尿病的发病均呈正相关。偏回归系数分别为1.49、1.15、0.93,P值均小于0.05,具有统计学意义。结论 UCP-2 启动子部位-866G/A基因多态性在糖尿病组与非糖尿病组之间存在着显著性差异,说明此多态性可能与糖尿病的发生有关,尤其是AA基因型携带者的C肽值明显降低,其机制可能是通过<WP=6>促进UCP-2的表达,使胰岛β细胞线粒体的解偶联作用增强,影响胰岛β细胞分泌胰岛素的代偿功能,从而促进糖尿病的发生和发展。