结直肠癌是一种常见的恶性肿瘤，而区域淋巴结或远处转移常导致治疗失败。肿瘤细胞发生上皮－间质转化(epithelial mesenchymal transition，EMT)是进入血管、淋巴管转移的首要步骤。诱导EMT的细胞因子和转录因子有Snail、Twist、TGF-β、Tiam1等。其中，TGF-β是EMT最主要的诱导因子之一。与肿瘤转移的关系最为密切。近年来，血小板与肿瘤进展的关系引人注目。血小板表面蛋白激活受体（Proteinase-activated receptor，PAR-1）活化后可激活α颗粒，在肿瘤进展过程中有着非常重要的意义。但目前尚不清楚血小板PAR1激活是否诱导结直肠癌EMT。目的：探讨血小板蛋白酶激活受体-1激活在结肠癌细胞SW620细胞上皮-间质转化中的作用并探讨其机制。方法：1用梯度浓度（0μM，1μM，3μM，5μM，7μM，9μM，10μM）的血小板PAR1激动剂（TFLLR-NH2）处理SW620细胞，用MTT法检测SW620细胞的增殖情况。用梯度浓度（0μM，1μM，3μM，5μM，7μM，9μM）的血小板PAR1激动剂（TFLLR-NH2）激活血小板，用流式细胞学技术检测血小板表面的CD62P来判断血小板的活化程度。2实验分组：①未激活血小板悬液100μL+SW620细胞（实验对照组）②激活血小板悬液100μL+SW620细胞（实验对照组）③激活血小板上清100μL+SW620细胞（实验组）④TGF-β12μL+SW620细胞（阳性对照组）⑤TFLLR-NH20.04μL+SW620细胞（单纯激动剂组）⑥培养基100μL+SW620细胞（阴性对照组）。按照实验分组，24孔板培养24小时后PathScan EMT Duplex IF Kit染色，激光共聚焦显微镜下观察SW620细胞E-cadherin、 Vimentin表达情况。3实验分组：①未激活血小板悬液400μL+SW620细胞（实验对照组）②激活血小板悬液400μL+SW620细胞（实验对照组）③激活血小板上清400μL+SW620细胞（实验组）④TGF-β120μL+SW620细胞（阳性对照）⑤TFLLR-NH20.4μL+SW620细胞（单纯激动剂组）⑥培养基400μL+SW620细胞（阴性对照）。按照实验分组，6孔板培养24小时后western blot检测SW620细胞E-cadherin、 Vimentin、Smad4的表达。4ELISA法（酶联免疫吸附实验法）检测梯度浓度（0μM，1μM，3μM，5μM，7μM，9μM）的PAR1激动剂（TFLLR-NH2）激活血小板后TGF-β1释放量。结果：1MTT实验：各个不同浓度（1μM，3μM，5μM，7μM，9μM，10μM）PAR1激动剂激活后492nm下测得OD值各组间差异无统计学意义（P>0.05）。流式细胞学：各浓度（1μM，3μM，5μM，7μM，9μM） PAR1激动剂处理组CD62P阳性率分别为（43.52±1.5）%，（64.22±3.60）%,（54.46±1.82）%,（53.15±2.7）%,（54.63±3.66）%均较对照组（0μM组）（14.35±0.86）%升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。2免疫荧光结果： TGF-β1和PAR1激活的血小板及上清均能下调E-cadherin表达，上调Vimentin表达，未激活的血小板与SW620细胞共培养24小时，能够下调E-cadherin表达，上调Vimentin表达。TFLLR-NH2对SW620细胞E-cadherin和Vimentin的表达无影响。3western blot结果：TGF-β1和PAR1激活的血小板及上清均能下调E-cadherin表达，上调Vimentin表达，未激活的血小板与SW620细胞共培养24小时，能够上调E-cadherin表达，下调Vimentin表达。TFLLR-NH2对SW620细胞E-cadherin和Vimentin的表达无影响。各个处理组与阴性对照组相比，Smad4表达无明显变化。4ELISA实验：梯度浓度（1μM，3μM，5μM，7μM，9μM） PAR1激动剂激活血小板后，其上清液中测得TGF-β1含量分别为0.095±0.003，0.133±0.005，0.322±0.007，0.497±0.012，0.571±0.012，0.592±0.021。各组TGF-β1含量均较对照组（0μM组）升高，其差异有统计学意（P<0.05），而7μM，9μM组之间无统计学意义（P>0.05）。结论：1低剂量（≤10μM）的PAR1激动剂（TFLLR-NH2）对人结肠癌细胞SW620的生长增殖及EMT的发生无影响。但可以激活血小板表面的PAR1受体，使血小板活化。2血小板表面的PAR1激活后能够促进人结肠癌细胞SW620发生EMT，这一过程可能是通过TGF-β/Non-Smad实现的。3血小板PAR1激活后，血小板α颗粒可以释放TGF-β1；在一定范围内随着PAR1激动剂浓度的升高，血小板释放的TGF-β1呈上升趋势。