论文部分内容阅读
目的:炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)包括克罗恩病(Crohn’s disease,CD)和溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC),是一种病因未明的慢性非特异性肠道炎症性疾病,具有慢性和反复发作的特点,在我国普遍流行。本研究拟分别建立CD和UC的动物模型并对两种动物模型进行验证,同时给予川芎嗪药物干预,以研究川芎嗪对实验性肠炎是否有治疗作用及其可能的分子机制。方法:分别建立TNBS诱导的CD大鼠模型和恶唑酮诱导的UC小鼠模型,并通过对病变肠段进行组织损伤评分、流式分析外周血中Th1细胞和Th2细胞的数量及比例判断造模结果。通过基因芯片技术和Western Blot验证两种模型中差异表达的基因。使用不同剂量的川芎嗪对CD模型的大鼠和UC模型的小鼠进行药物干预,分别获取其SMC、PBMC和LPMC,流式分析Th1细胞和Th2细胞的比例,Annexin V法检测细胞凋亡率,并抽提LPMC的总RNA,RT-PCR法检测IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、IL-33、VCAM-1、IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-ɑ、ICAM-1、i NOS、NF-κB、NF-AT、AP-1和P-selectin等多种细胞因子的表达差异。结果:我们成功建立了CD大鼠模型和UC小鼠模型,并改良了CD的建模方法,证实了TNBS诱导的CD大鼠模型是一种以Th1亚群细胞占优势的肠粘膜局部免疫紊乱的模型,而恶唑酮诱导的UC模型是一种以Th2亚群细胞占优势的肠黏膜局部免疫紊乱的模型。我们通过基因芯片和WB发现在CD模型中,TSC-22、STAT3、IFITM1和PAI-2的表达是上调的,Galectin-9和MIP-1a的表达是下调的;在UC模型中,Ig HG3、PAI-2和NOS2A的表达是上调的,MDR1、HGF和PXR的表达是下调的。我们发现2mg/ml的川芎嗪能显著抑制CD模型的大鼠和UC模型的小鼠的P-selectin的表达、促进LPMC的凋亡,并分别抑制IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、IL-33、VCAM-1、IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-ɑ、ICAM-1和i NOS等细胞因子的表达。结论:川芎嗪可诱导LPMC凋亡和抑制IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、IL-33、VCAM-1、IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-ɑ、ICAM-1、i NOS和P-selectin细胞因子的表达,可能对炎症性肠病治疗起重要作用。