ET-1、VEGF在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与血管生成关系的研究

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目的:卵巢上皮性肿瘤是最常见的卵巢肿瘤,其恶性类型占卵巢恶性肿瘤的85%~95%,而卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤,死亡率居妇科恶性肿瘤的首位。传统的三大治疗方法虽有一定进步,但因临床症状隐匿,早期诊断困难,晚期病人疗效不佳。目前卵巢癌的疗效仍难以令人满意。研究表明血管生成是实体肿瘤生长和转移的必备条件,而且与腹水生成有关。肿瘤和宿主组织均可产生多种血管生成因子,他们相互作用,参与肿瘤血管形成的各个阶段。血管内皮生长因子(VEGF)是一种主要的血管生成因子,VEGF与受体结合后,通过一系列信号转导途径促进肿瘤血管形成。内皮素-1(ET-1)通过作用于肿瘤细胞和血管内皮细胞参与肿瘤血管生成并且与VEGF有协同作用。肿瘤组织的微血管密度(MVD)的表达可以评价肿瘤血管生成程度,反映肿瘤的恶性程度及侵袭性。本文通过研究卵巢上皮性肿瘤中ET-1、VEGF、MVD的表达情况及其与不同临床病理参数的关系,分析ET-1、VEGF二者之间的相关性,探讨其与血管生成的关系,进一步深入了解卵巢上皮性肿瘤血管生成活性及其调节机制,为卵巢癌的抗血管生成治疗提供新思路。方法:研究标本取自河北医科大学第四医院2005年4月至2006年10月在妇科初次治疗的卵巢上皮性肿瘤患者60例,术后均经病理确诊。卵巢上皮性癌46例,其中浆液性癌22例,黏液性癌6例,子宫内膜样癌18例。根据国际妇产科联盟(FIGO,1986)标准分期,I、II期8例,III、IV期38例。14例良性卵巢肿瘤,均为黏液性囊腺瘤。应用免疫组织化学技术检测14例卵巢囊腺瘤和46例卵巢癌中ET-1、VEGF蛋白的表达。并用第八因子相关抗原抗体(FⅧ)单抗标记肿瘤新生血管的内皮细胞,在显微镜下计数肿瘤内微血管密度。以及应用流式细胞定量分析技术检测36例卵巢上皮性肿瘤中ET-1蛋白的表达情况及卵巢肿瘤组织细胞的凋亡率和增殖指数。运用统计软件SPSS12.0对数据进行统计学分析。结果:1 ET-1蛋白表达及与不同病理参数的关系,ET-1主要着色于肿瘤细胞胞浆,表现为浅黄色或棕褐色颗粒。此外,阳性肿瘤组织及邻近基质组织中血管内皮细胞和成纤维细胞也有不同程度着色。ET-1在卵巢肿瘤良、恶性组表达率分别为14.28%,69.56%,差异有显著性(P<0.05)。ET-1在卵巢癌病理分级G1-2组和G3组的表达率分别为50%,81.82%,差异有显著性(P<0.05)。ET-1的表达与FIGO分期、年龄、组织病理类型无关(P>0.05)。2 VEGF蛋白表达及与不同病理参数的关系,VEGF主要分布于肿瘤细胞胞浆,在肿瘤细胞坏死灶周围尤为显著,阳性肿瘤组织内及邻近基质组织中血管也有着色。VEGF在卵巢肿瘤良、恶性组表达率分别为14.28%,60.87%,差异有显著性(P<0.05)。VEGF在卵巢癌病理分级G1-2组和G3组的表达率分别为41.67%,90.91%,差异有显著性(P<0.05)。VEGF在卵巢癌FIGO分期I-II期表达率为25%,III-IV期表达率为73.68%,差异有显著性(P<0.05)。VEGF的表达与年龄、组织病理类型无关(P>0.05)。3第八因子相关抗原抗体(FⅧ)单抗标记肿瘤新生血管。MVD在卵巢肿瘤良、恶性组的表达分别为8.71±1.73、14.09±4.74,差异有显著性(P<0.05);MVD在卵巢癌FIGO分期I-II期表达为7.50±3.31,III-IV期表达为14.21±4.14,差异有显著性(P<0.05)。MVD在卵巢黏液性癌、浆液性和宫内膜样癌的表达分别为22.00±1.03,13.56±3.47,12.27±3.88,黏液性癌中MVD表达高于浆液性和宫内膜样癌,差异有显著性(P<0.05)。MVD与年龄、分化程度无关(P>0.05)。4等级相关分析:ET-1蛋白与VEGF蛋白在卵巢肿瘤中的表达存在正相关关系(P<0.05)。MVD在VEGF、ET-1蛋白表达阳性组与阴性组间的表达存在显著差异(P<0.05)。5流式细胞定量分析技术检测结果,卵巢癌、交界性卵巢肿瘤、卵巢囊腺瘤中ET-1蛋白的相对含量分别为(664.42±80.07),(524.78±12.25),(529.23±28.86)三者之间差异有显著统计学意义(P<0.05),在卵巢癌病理分级G1-2组和G3组的ET-1蛋白的相对含量分别为(624.70±38.04),(724.01±92.39),二者之间差异有显著统计学意义(P<0.05).6凋亡率与增殖指数结果:卵巢囊腺瘤(14.33±5.28)和交界性肿瘤(14.46±4.17)的凋亡率明显低于卵巢癌(19.46±7.16),三者之间差异有显著统计学意义(P<0.05);病理分级G3组凋亡率高于G1-2组,二者之间有显著统计学意义(P<0.05);卵巢囊腺瘤的增殖指数(0.87±0.11)和交界性肿瘤的增殖指数(0.89±0.22)低于卵巢癌(0.93±0.22)。表明:卵巢癌细胞凋亡率与增殖活性均明显高于良性卵巢肿瘤组织;在卵巢癌中随病理分级增高凋亡率与增殖指数也增强。结论: 1 ET-1、VEGF在卵巢癌组织中的表达明显高于卵巢交界性肿瘤和卵巢囊腺瘤,表明ET-1、VEGF与卵巢癌的发生发展及恶性生物学行为有密切关系。VEGF、ET-1含量为肿瘤良恶性诊断、分化程度提供可能的理论依据。2 MVD在卵巢癌组织中的表达较卵巢交界性肿瘤和卵巢囊腺瘤明显升高,其表达与患者FIGO分期有关,差异有统计学意义。提示肿瘤血管生成可能参与了卵巢癌的发生发展的过程。通过测量肿瘤组织中MVD的表达,不仅可以评价肿瘤血管生成程度,而且可以反映其恶性程度.3对卵巢肿瘤组织中ET-1与VEGF的蛋白表达进行相关性分析,二者表达呈正相关,表明ET-1可能通过上调VEGF表达,参与肿瘤微血管形成。ET-1、VEGF表达阳性组与阴性组MVD值均有显著性差异。4卵巢癌组织的细胞凋亡率和细胞增殖指数均高于卵巢交界性肿瘤和卵巢囊腺瘤,在卵巢癌中随病理分级增高凋亡率与增殖指数也增强。
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