【摘 要】
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锌指基因家族是最大的人类基因家族之一,其蛋白产物主要通过与DNA结合或聚合而起转录因子的重要作用.该文利用krüppel型(Cys/His型)锌指基因顺序上的保守特征,设计简并引物
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锌指基因家族是最大的人类基因家族之一,其蛋白产物主要通过与DNA结合或聚合而起转录因子的重要作用.该文利用krüppel型(Cys<,2>/His<,2>型)锌指基因顺序上的保守特征,设计简并引物从人类早期胚胎cDNA文库中初步筛选克隆出四个krupple型锌指蛋白新基因,经国际基因命名委员会批准命名为ZNF323、ZNF360、ZNF359和ZFP28.其中ZNF323基因全长3179个碱基,含8个外显子,定位于6p22.1-22.3,在基因组DNA上长29.45Kb,其编码蛋白质全长406个氨基酸,含有1个SCAN框和6个krupple型锌指.Northern Bolt分析表明ZNF323基因在人类早期胚胎不同时期(18~25周)表达水平不同,在肺,肾和肝脏的表达水平较强,其它组织表达较弱.Northern Bolt分析表明该基因在人类早期胚胎(19~25周)的各个组织中普遍表达,尤其是在肾,心脏和肺的表达水平最强.ZNF359基因长3271个碱基,含6个外显子,在基因组DNA上长18kb.它编码的蛋白质全长643个氨基酸,含一个KRAB框,16个C2H2型的锌指,在两者之间还有一个典型的中间重复序列.Northern Bolt分析表明该基因在人类早期胚胎的各个组织中普遍表达,其在肾,心脏和肺的表达水平最强.ZFP28基因长4076个碱基,含8个外显子,在基因组DNA上长18kb.它编码的蛋白质全长868个氨基酸,含1个信号肽,2个KRAB框和14个C2H2型的锌指.Northern Bolt分析表明该基因在人类早期胚胎的各个组织中普遍表达,在肺和肝中的表达水平最强.综合这些基因的结构和表达特征,我们可以初步得出一个结论:它们编码的是参与多种人类胚胎器官发生的锌指转录调控因子.同时我们收集人类药物流产的早期胚胎,观察发现胚胎畸形占17.86﹪,早期致死占32.54﹪;采用组织切片技术将胚胎制成一系列石蜡连续切片,染色后显微观察畸形和正常的早期胚胎内部心脏等器官的发育情况,发现胚胎外部畸形与体内畸形存在一定关联,对此我们将做进一步的研究.
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