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目的本实验以中医“治未病”的思想理论为指导,以皮下注射D-半乳糖建立的衰老模型大鼠为实验对象,在前期研究的基础上,进一步观察与探讨“双固一通”电针法对衰老模型大鼠的治疗作用及T细胞免疫机制,为临床研究提供依据,并促进其在防治衰老领域中的应用。方法清洁级SD健康大鼠雌性40只,5月龄,体重(180±20)g,根据简单随机排序法分为每组各10只,即青年对照组、衰老模型组、电针强壮穴组、电针对照组,采用D-半乳糖(D-ga1)致亚急性衰老法造成大鼠亚急性衰老模型。电针强壮穴组取“关元”、“后三里”、“百会”；电针对照组取“中极”、“阴陵泉”、“印堂”。两组电针组均选用HANSLH202H型电针仪,连续波,频率2Hz,强度为1mA,通电15min。采用Moris水迷宫实验比较学习记忆行为能力的变化；采用黄嘌呤氧化酶法检测血清中SOD活性,用硝酸盐还原酶法测定血清中MDA含量；手术摘取胸腺与脾脏计算胸腺与脾脏指数变化；透射电镜法观察衰老模型大鼠胸腺细胞超微结构的改变,来观察“双固一通”电针法对D-半乳糖诱导的衰老模型大鼠延缓衰老的疗效。采用流式细胞仪检测T细胞亚群CD4+；CD4+CD45R0+；CD8+；CD8+CD45R0+；CD45RA+；CD45R0+；CD45RA+/CD45R0+阳性T细胞表达的变化,探讨“双固一通”电针治疗延缓衰老的机制。结果1. Moris水迷宫检测,与正常对照组相比,衰老模型组大鼠找到平台的时间延长(P<0.01)；与衰老模型组相比,两组电针治疗组找到平台的时间缩短(P<0.05)；两组电针组相比,“双固一通”电针组找到平台的时间缩短(P<0.05)。2.与正常对照组相比,衰老模型组血清中SOD活性明显降低(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01)；与衰老模型组相比,两组电针治疗组SOD活性均提高(P<0.01),MDA含量均降低(P<0.05)；两组电针组之间相比,“双固一通”电针组SOD活性较电针对照组升高(P<0.05),MDA含量较电针对照组降低(P<0.05)。3.手术摘取脾脏计算脾脏指数变化衰老模型组与正常对照组相比,脾脏指数降低(P<0.05),胸腺指数降低(P<0.05),差异显著。与衰老模型组相比,两组电针组脾脏指数明显升高(P<0.05),胸腺指数明显升高(P<0.05),同时“双固一通”电针组疗效优于电针对照组(P<0.05)。4.透射电镜法观察胸腺超微结构与正常对照组相比较,衰老模型组淋巴细胞萎缩退化,形状不规则,可见细胞核固缩,核周间隙扩大,核内染色质边集,大量胸腺细胞出现凋亡或变性坏死,胞浆内细胞器坏死,细胞膜破裂,胞浆外溢,线粒体肿大变性,嵴断裂或消失。两组电针组在胸腺细胞凋亡,细胞膜、细胞核及细胞器的破坏程度等方面均轻于衰老模型组,而“双固一通”电针组在以上组织的破坏程度更是小于电针对照组。5.采流式细胞仪检测T细胞亚群细胞阳性表达。①与正常对照组相比,衰老模型组CD4+T细胞表达降低(P<0.01),而CD4+CD45R0+T细表达升高(P<0.01),差异明显；与衰老模型组相比,“双固一通”电针组(P<0.01)和电针对照组(P<0.05)CD4+T细胞表达均升高,“双固一通”电针组(P<0.05),和电针对照组(P<0.05)CD4+CD45R0+T细胞表达均降低,差异明显；与“双固一通”电针组相比,电针对照组CD4+T细胞表达降低(P<0.05),CD8+CD45RO+T细胞表达升高(P<0.05)。②与正常对照组相比,衰老模型大鼠,CD8+T细胞(P<0.01)及CD8+CD45RO+T细胞(P<0.05)表达升高；与衰老模型组相比,“双固一通”电针组CD8+T细胞(P<0.01)及CD8+CD45RO+T细胞(P<0.05)表达降低,电针对照组CD8+T细胞表达减少(P<0.05),但CD8+CD45R0+T细胞表达无明显差异(P>0.05)；与“双固一通”电针组相比,电针对照组CD8+T细胞(P<0.05)及CD8+CD45RO+T细胞(P<0.05)表达升高。③与正常对照组相比,衰老模型组CD45RA+T细胞表达降低(P<0.01),而CD45RO+T细胞表达升高(P<0.01),CD45RA+/CD45R0+比值降低(P<0.05)；与衰老模型组相比,“双固一通”电针组CD45RA+T细胞表达升高(P<0.05),CD45R0+阳性T细胞表达降低(P<0.01),CD45RA+/CD45R0+比值升高(P<0.01)；电针对照组CD45RA+T细胞表达升高(P<0.05),CD45R0+T细胞表达降低(P<0.05),CD45RA+/CD45R0+比值升高(P<0.05)；与“双固一通”电针组比较,电针对照组CD45RA+T细胞表达降低(P<0.05),CD45RO+T细胞表达升高(P<0.05),CD45RA+/CD45R0+比值降低(P<0.05)。结论1.“双固一通”电针法对D-半乳糖所致衰老模型动物学习记忆与空间辨别能力,自由基代谢、免疫相关指数、胸腺超微形态结构等具有明显改善作用,有效延缓机体衰老,疗效显著。2.“双固一通”电针法可升高CD4+；CD45RA+T细胞表达及CD45RA+/CD45R0+比值,而降低CD4+CD45R0+；CD8+；CD8+CD45R0+及CD45RO+T细胞表达,对机体的免疫系统及细胞免疫起到了良性调节作用。3.“双固一通”电针法延缓衰老的疗效优于普通针刺组。