DNA糖基化酶MutM(真核生物中称为OGG1)在碱基切除修复系统(BER)中起着十分重要的作用,不但可以识别DNA损伤,而且能切除损伤的碱基,是一种作用底物广泛的双功能糖基化酶。特别是在活性氧自由基产生的最常见、致突变性最强的8-oxoguanine (8-oxoG)的修复中,MutM起着关键的作用,其作用机制研究得已比较透彻,但对某些损伤的具体修复机制还不清楚。已报道,无论大肠杆菌中的MutM,还是啤酒酵母中的OGG1,都可以识别并结合C／C错配,但不能将其修复,且错配修复系统(MMR)、核苷酸切除修复系统(NER)等也无法单独完成C／C错配的识别和修复；大肠杆菌中的MutM还可以降低错误重组几率,但具体机制还未知。总之,MutM参与的途径有待进一步研究。本研究主要以分枝杆菌的模式生物耻垢分枝杆菌M. smegmatis为研究对象,来深入探索和研究MutM所参与的修复途径的具体机制,同时也对MutM参与的未知通路进行挖掘。为了寻找可能与MutM相互作用的蛋白因子,我们首先采用MutM作为诱饵蛋白,利用最近才发展起来的分枝杆菌重组工程系统将串联亲和纯化标签TAP (protA/CBP) tag基因序列敲入到M. smegmatis基因组中MutM基因的3’末端,然后利用串联亲和纯化(TAP)的方法从其蛋白组中垂钓出与MutM相互作用的蛋白。纯化的蛋白经过SDS-PAGE分离和银染显色后,再经过质谱鉴定,发现了一个新的与MutM相互作用的蛋白UvrA。并且通过体外的SBP pull-down实验和far-western blot分析实验也验证了它们之间的相互作用。鉴于真核生物中MMR和NER共同参与一些类型的损伤修复比如C／C错配和UV损伤,再加上在分枝杆菌,无论是耻垢分枝杆菌中还是结核分枝杆菌中都没有发现错配修复系统(MMR)的存在这一事实,并且现在我们又发现并证明了MutM和UvrA间确实存在相互作用,因此我们推测在分枝杆菌中,BER和NER之间也可以像真核生物中MMR和NER一样在一些损伤修复中发挥着协同的作用。对于C／C错配的修复,不但已发现真核生物中NER参与其中,而且C／C错配也具有NER的底物性质即含螺旋扭曲,同时原核生物中的MutM也可以结合C／C错配,因此推测MutM和NER途径中某些蛋白一起参与了C／C错配的修复。本研究发现并成功验证了MutM和UvrA之间的相互作用,从而为进一步深入研究NER和BER之间协同作用提供一个新的切入点。