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系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一多因子遗传相关疾病,遗传因素在SLE的发病中起着重要作用。本次研究采用病例对照研究、病例亲本研究和单纯病例研究设计,应用DNA体外扩增—聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)、限制性片段长度多态性(Restriction FragmentLength Polymorphism,RFLP)等分子生物学技术,在华东地区汉族人群中探讨了遗传因素与SLE发病及其表型的相关性。结果如下:一、系统性红斑狼疮的遗传易感性研究(一)、基因多态位点基因型及等位基因分布1.CTLA-4基因-1722T＞C位点在病例组和对照组中T/T、C/T和C/C基因型频率有显著性差异(χ~2=7.828,P=0.020),以C/C基因型为参照,具有T/T基因型者,其SLE发病风险升高,OR为1.98(95%CI:1.21-3.23),具有C/T或T/T基因型者,其OR为1.65(95%CI:1.06-2.57);病例组和对照组-1722T等位基因和-1722C等位基因频率有显著性差异,(χ~2=8.070,P=0.005),病例组-1722T等位基因频率高于对照组(63.6%vs 55.3%)。2.CTLA-4基因-318C＞T位点在病例组和对照组中基因型及等位基因频率分布未发现统计学差异。3.PD12位点在病例组和对照组中A/A、A/G和G/G基因型频率差异具有统计学意义(χ~2=37.313,df=2,P＜0.001);以A/A基因型为参照,具有A/G基因型者,其SLE发病风险升高(OR=2.70,95%CI:1.90-3.84),G/G基因型者SLE发病风险也升高(OR=3.84,95%CI:1.94-7.59),A/G或G/G基因型携带者,其OR为2.84(95%CI:2.02-3.98);病例组和对照组A等位基因和G等位基因频率有显著性差异,(χ~2=34.452,P＜0.001),病例组G等位基因频率高于对照组(36.4%vs20.7%)。4.PD15位点在病例组和对照组中C/C、C/T和T/T基因型频率差异具有统计学意义(χ~2=7.699,df=2,P=0.021);以C/C基因型为参照,具有C/T基因型者,其SLE发病风险升高(OR=1.60,95%CI:1.14-2.45),C/T或T/T基因型携带者,其OR为1.52(95%CI:1.08-2.12);病例组和对照组C等位基因和T等位基因频率有显著性差异,(χ~2=4.473,P=0.034),病例组T等位基因频率高于对照组(24.4%vs 19.2%)。5.PD16位点在病例组和对照组A/A、A/G和G/G基因型频率差异有统计学意义(χ~2=20.842,df=2,P＜0.001);以A/A基因型为参照,A/G基因型携带者的SLE发病风险升高(OR=1.83,95%CI:1.29-2.59),G/G基因型携带者的SLE发病风险同样升高(OR=5.93,95%CI:2.17-16.17),A/G或G/G基因型携带者,其OR为2.04(95%CI:1.45-2.85);病例组和对照组A等位基因和G等位基因频率有显著性差异(χ~2=20.769,P＜0.001),病例组G等位基因频率高于对照组(28.6%vs17.0%)。(二)、连锁不平衡检验及单倍型分析1.连锁不平衡检验显示,CTLA-4基因两位点不同等位基因之间不是随机组合的,呈不完全连锁不平衡状态;PDCD1基因两两位点不同等位基因之间也不是随机组合的,呈不完全连锁不平衡状态。2.单倍型在病例组和对照组分布分析结果显示,CTLA-4基因具有T-C、T-T单倍型者SLE发病风险增加,具有C-C单倍型者SLE发病风险降低。PDCD1基因具有A-C-G、A-T-A、G-C-A单倍型者SLE发病风险增加,具有A-C-A单倍型者SLE发病风险降低。(三)、系统性红斑狼疮传递不平衡检验1.CTLA-4 -1722T＞C位点在家系中传递,经TDT与sTDT的联合检验Zcomb=2.121,P＜0.05,差异具有统计学意义。2.PD15 T等位基因传递给患病子代的概率大于C等位基因,TDT检验,χ~2=4.840,联合检验Zcomb=2.020,P均＜0.05。3.PD12位点和PD16位点未发现家系中传递/不平衡统计学上的显著性,Zcomb分别为0.560、0.695,P＞0.05。二、系统性红斑狼疮基因与表型的相关性研究1.CTLA-4基因多态性与临床表型关系的分析显示,-1722T＞C位点与抗SSA抗体相关,以C/C基因型为参照,抗SSA抗体阳性的患者中T/C基因型的频率升高(P=0.030,OR=2.91,95%CI:1.11-7.65),T/T基因型的频率也升高(P=0.023,OR=3.12,95%CI:1.16-8.36)。-318C＞T位点与抗RNP抗体相关,抗RNP抗体阳性的患者中-318C＞T位点C/T与T/T合并基因型的频率降低(P=0.044,OR=0.41,95%CI:0.17-0.95)。PDCD1基因多态性与临床表型关系的分析显示,PD16位点多态性与抗SSA抗体相关,以A/A基因型为参照,抗SSA抗体阳性的SLE患者中PD16位点G/G基因型频率更低(P=0.016,OR=0.23,95%CI:0.07-0.76);PD12位点与浆膜及肾脏损害相关,以A/A基因型为参照,浆膜和肾脏损害的SLE患者中PD12位点G/G基因型的频率较高(P=0.002,OR=7.31,95%CI:2.08-25.74:P=0.011,OR=3.91,95%CI:1.36-11.21)。2.在单倍型与临床表型的相关性分析中,发现以不具备某种单倍型为参照,CTLA-4基因的C-C对ANA、抗SSA及补体C3C4具有保护作用,对抗dsDNA、抗Sm、抗RNP、皮肤黏膜、关节、浆膜、肾脏和血液系统损害表现为危险作用;T-C对ANA、抗Sm、关节、浆膜和肾脏损害表现为保护作用,对抗dsDNA、抗SSA、抗SSB及补体C3C4、皮肤和血液系统表现为危险作用;T-T对ANA、抗Sm、肾脏、神经和血液系统损害表现为危险作用,而对抗dsDNA、抗SSA、抗RNP、补体C3C4、皮肤和关节表现为保护作用。PDCD1基因的A-C-A为抗dsDNA、抗SSA、血液系统损害的危险单倍型,为抗Sm、抗SSB、抗RNP、C3C4、关节、肾脏和神经的保护单倍型;A-T-A为ANA的保护单倍型,为抗Sm、抗SSB和关节损害的危险单倍型;G-C-A为抗dsDNA、抗SSA和关节损害的保护单倍型,为抗Sm、抗SSB、C3C4、皮肤黏膜、浆膜、肾脏、神经和血液系统损害的危险单倍型:G-C-G为ANA、抗dsDNA、抗Sm、抗SSA、抗SSB、皮肤黏膜和关节损害的危险单倍型,为抗RNP、C3C4、神经和血液系统的保护单倍型;G-T-A为ANA、抗dsDNA、抗Sm、抗SSA和关节损害的保护单倍型,为抗SSB、抗RNP、C3C4、皮肤黏膜、浆膜和血液系统损害的危险单倍型;G-T-G为抗dsDNA、抗SSA、皮肤黏膜和肾脏损害的危险单倍型,为ANA、抗Sm、抗SSB、抗RNP、C3C4、关节、浆膜、神经和血液系统损害的保护单倍型。