太子参多糖在缺氧/复氧诱导的心肌细胞程序性坏死中的作用

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背景急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)的发病率逐年上升,成为人类死亡的主要原因之一。在急性心肌梗死发生发展过程中,心肌细胞缺血,缺氧导致心肌细胞发生不可逆的损伤,因此,可及时有效的开通受损冠状动脉的再灌注治疗(溶栓疗法、经皮冠脉介入治疗等),已成为治疗急性心肌梗死的主要方法。但在开通受损冠脉的过程中,再灌注本身也会加重心肌损伤称为缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤。心肌细胞I/R损伤是影响急性梗死预后的主要原因。心肌细胞缺血/再灌注会导致心肌细胞凋亡、坏死以及炎症反应。研究表明心肌细胞坏死包括程序性坏死(necroptosis)。受体相关蛋白激酶-3(RIPK-3)是程序性坏死的重要调控激酶。程序性坏死在心肌缺血/再灌注损伤中发挥重要作用。太子参(radix pseudostellariae,RP)为石竹科植物孩儿参[Pseudostellaria heterophylla(Miq.)Pax.]的干燥块根,含有环肽类、皂苷类、多糖等成分。太子参具有改善慢性心衰、缓解记忆衰退等药理作用,其中太子参多糖(radix pseudostellariae polysaccharides,RPPs)在抗氧化应激、抗炎、调节机体免疫力等方面有显著作用。目的本研究旨在探索太子参多糖在缺氧/复氧诱导的心肌程序性坏死中的具体作用及可能机制。方法体外心肌细胞缺氧/复氧损伤模型以模拟体内心肌细胞缺血/再灌注损伤。本课题使用SD新生大鼠的原代细胞。将原代心肌细胞分为:对照组、缺氧/复氧组、太子参多糖预处理心肌细胞+缺氧/复氧组。联合使用乳酸脱氢酶(LDH)法检测心肌细胞的LDH释放量及碘化丙腚(propidium iodide,PI)染色剂染色心肌细胞反应细胞坏死情况,细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测心肌细胞存活数,同时应用免疫印迹法(Western Blot)检测心肌细胞中RIPK3蛋白水平。结果1.太子参多糖预处理心肌细胞对心肌细胞无毒性作用。2.太子参多糖预处理心肌细胞明显降低缺氧/复氧诱导的心肌细胞LDH释放量,减少心肌细胞坏死数量,增加心肌细胞存活率,降低缺氧/复氧诱导的心肌细胞坏死的损伤程度。3.太子参多糖预处理心肌细胞显著降低缺氧/复氧所致的心肌细胞RIPK3表达的水平,减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞程序性坏死的损伤程度。结论研究结果提示太子参多糖导致RIPK3蛋白水平降低,在缺氧/复氧诱导的心肌程序性坏死中起保护作用。
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