【摘 要】
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目的:肿瘤引流淋巴结(Tumor-draining lymph node,TDLN)是位于肿瘤引流区的淋巴结,它长期接受肿瘤抗原的刺激,既是早期肿瘤细胞转移的暂时的天然屏障,又是肿瘤细胞远处转移的
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目的:肿瘤引流淋巴结(Tumor-draining lymph node,TDLN)是位于肿瘤引流区的淋巴结,它长期接受肿瘤抗原的刺激,既是早期肿瘤细胞转移的暂时的天然屏障,又是肿瘤细胞远处转移的中继站。TDLN含有丰富的淋巴细胞,由于其特殊的位置,又含有较多的已摄取肿瘤抗原的树突状细胞(Dendritic cell,DC),是一种较好获得的对肿瘤细胞有很强杀伤作用淋巴细胞的潜在来源。DC是体内功能最为强大的专职抗原递呈细胞(Antigen presenting cell,APC)。在捕获肿瘤抗原后,DC迁移至TDLN,发育成熟并递呈抗原,诱导T细胞分化、成熟,杀伤肿瘤细胞。但是在患者体内,DC往往受到IL-10等抑制因子的作用不能有效地递呈抗原。本实验采取体外培养食管癌引流区淋巴结细胞的方法,减少抑制因子的作用,使DC有效地递呈抗原,得到大量对肿瘤有特异性杀伤作用的细胞,再回输同体食管癌裸鼠移植瘤模型,研究食管癌肿瘤引流区淋巴结细胞在裸鼠体内对肿瘤细胞的生长抑制和杀伤作用。方法:手术时摘除食管癌引流区肉眼判断无转移淋巴结2-3枚。同时从食管外侧切开食管壁,避开纤维组织丰富处,无菌切除癌组织一块。将淋巴结用D-Hank’s液冲洗两遍,去除结缔组织和脂肪组织,用剪刀剪碎,悬于30毫升含IL-2 175U/ml,IL-4 500U/ml,GM-CSF 100U/ml的RPMI 1640培养基中,置于37℃,5%CO2培养箱培养。定期观察形态学
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