【摘 要】
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籽粒硬度和面筋强度是小麦品质改良育种工作最重要的两个方面。在实际生产上,需要将籽粒硬度和面筋强度二者综合考虑,以得到具有各种不同终用途的专用优质小麦品种,例如强筋
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籽粒硬度和面筋强度是小麦品质改良育种工作最重要的两个方面。在实际生产上,需要将籽粒硬度和面筋强度二者综合考虑,以得到具有各种不同终用途的专用优质小麦品种,例如强筋硬质小麦适合于生产优质面包,弱筋软质小麦适合于制作优质蛋糕。 籽粒硬度直接影响小麦的磨粉品质,是决定小麦品质优劣、终用途和贸易价格的重要指标之一。它是由位于小麦染色体5D短臂上的Ha(hardness)位点上的主效基因所控制,它编码Friabillin蛋白。Friabillin蛋白主要由Puroindoline蛋白(PIN)和GSP蛋白(grain softness protein)组成。PIN蛋白又包括Puroindoline A(PINA)和Puroindoline B(PINB),它们分别由puroindoline a(pina)和puroindoline b(pinb)基因编码。 利用转基因技术和杂交育种,应用实验室已经建立的含有pina和1Ax1﹑1Dx5基因的一系列转基因株系,定向培育了含有优质高分子量麦谷蛋白亚基1Ax1、1Dx5和 pina基因不同组合的小麦材料。建立了硬粒小麦(四倍体)与普通小麦(六倍体)两套研究小麦品质的完整材料体系,特别是在四倍体小麦Luna和Ofanto中,得到了表达HMW-GS1Ax1﹑1Dx5和PINA的所有组合材料。为进一步的分子设计研究两类基因以得到预期的优质小麦品种提供了强有力的实验基础。 本文重点运用 PCR方法分析四倍体转基因小麦杂交亲本以及后代中的外源pina基因。进行了亲本及 F2代中外源 pina基因的分析鉴定。然后,使用Trition-X-114和Tricine两种方法提取PINA蛋白。同时,利用SDS-PAGE方法鉴定了两种转基因六倍体杂交亲本中的HMW-GS1Ax1﹑1Dx5。
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