磁响应型GOD的固定化及其对棉纤维的漂白

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葡萄糖氧化酶(GOD)可广泛地应用于纺织、食品、生物传感器等领域,但是在工业应用中存在易失活、难回收等问题,使得GOD成本较高,严重限制其在更广泛的产业用中应用。对酶进行固定化能提高酶的稳定性,实现回收和反复利用,降低成本,利于酶的大规模生产利用。本课题研究磁性固定化GOD的制备技术,以聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDDA)包覆的四氧化三铁(Fe3O4)制备的磁性颗粒为载体,采用酶与载体之间的电荷吸附制备磁性固定化GOD,以实现GOD在磁场中快速回收利用,对制备工艺进行研究,探讨固定化酶的酶学性质。利用固定化葡萄糖氧化酶对葡萄糖进行分解,将产生的过氧化氢用于棉织物的漂白。主要研究内容和结果如下:1)在空气环境下,分别以NaOH和氨水作为沉淀剂,通过共沉淀法制备Fe3O4纳米粒子,采用强阳离子聚电解质PDDA对Fe3O4进行包覆。利用扫描电子显微镜、X射线衍射仪、振动磁强计等仪器对Fe3O4的形态结构和磁性能进行分析,结果表明,在相同条件下,采用氨水作为沉淀剂制备出10nm左右的接近超顺磁性的Fe3O4纳米粒子,比饱和磁化强度为73.114emu/g,性能优于NaOH作为沉淀剂的情况。当PDDA浓度为20%,超声时间30min,包覆温度20℃,对Fe3O4进行包覆,得到的PDDA-Fe3O4复合纳米粒子粒径小于20nm,比饱和磁化强度为58.583emu/g,矫顽力9.25580e,接近超顺磁性。2)以PDDA-Fe3O4复合纳米粒子为载体固定GOD,固定化酶的最佳条件为:固定化温度5℃,固定时缓冲液的pH值为7,载体质量为1.5g,给酶量为5mg。酶与载体的质量比为1:30。固定化酶的最适pH值为8,最佳反应温度为60℃,在连续催化底物5次后仍保留原酶活力的68%,固定化葡萄糖氧化酶的热稳定性和酸碱稳定性适用范围均比游离酶有所提高。3)通过Design-Expert软件对影响棉织物漂白的反应时间、过氧化氢浓度、反应温度、pH值进行工艺优化,建立数学模型,并进行了验证试验。结果表明,模型的预测值与试验真实值的相关性达96.8%,得到棉织物白度最大值的条件为:反应时间85.23min,漂白液中过氧化氢的浓度4.22g/L,温度96.95℃,pH值10.86,预测白度值为89.3883。经对工艺参数进行修正后进行试验,得到的实际白度值为89.22,与预测值偏差小于2%,说明用该模型对过氧化氢漂白棉织物的工艺优化是合理的。漂白液的pH值对织物的力学性能影响显著,pH值越高,织物的力学性能越差。
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