小麦耐盐突变体盐胁迫应答基因的分离和鉴定

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土壤盐渍化是影响农业生产和生态环境的严重问题,耕地的减少和淡水资源的不足将迫使人类开发利用大面积的盐碱地、海岸带和滩涂地带,因此植物耐盐机理和耐盐植物的培育将爱到人们越来越多的关注.为了研究这一问题,利用近年来发展的RNA指纹技术cDNA-AFLP(cDNA-amplifiedfragmentlengthpolymorphism)分析了"一粒传"后代小麦耐盐突变体耐盐性较强的RH8706-49(saltresistantSR)和盐比较敏感的H8706-34(saltsensitiveSS)在盐胁迫和非胁迫下基因表达的差异.采用90对引物组合,共获得4860条从100bp-10000bp的cDNA扩增条带,其中85.3﹪的条带在4个样品中是一致的,只有14.7﹪的条带在4个样品中表现出差异.选取其中的68条差异条带进行了克隆,测序35个,经Internet进行Blast比较,11个片段(31.4﹪)与已知基因具有较高的的同源性,主要包括与离子转运有关的蛋白、与信号传导有关的蛋白以及与氧化胁迫有关的蛋白.24个片段(68.6﹪)与已知基因同源性较低或没有同源性,可能是一些未知基因.一个在小麦SR品系中受盐诱导的cDNA片段编码与玉米、三叶草和紫花苜蓿中的糖原合成酶激酶-表面激酶(GSK3-shaggykinase)(相应部分的同源性分别为80﹪、72﹪、72﹪)同源的基因,命名为TaGSK1.Northern杂交证明它确实是受盐胁迫诱导表达的基因,并且在耐盐材料中诱导表达强于盐敏感材料.
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