水稻粉质胚乳突变体b381基因功能研究和巨大胚突变体N2-52垩白形成机理的初步研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huoshu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
淀粉是水稻种子重要的贮藏物质和水稻胚乳的主要构成成分。淀粉的合成受到多种酶的调控,是一个复杂而精密的过程。淀粉合成异常会导致胚乳呈现局部不透明或完全不透明的性状,影响其品质。虽然已报道有多个调控淀粉合成的基因,但对淀粉合成的分子机制和调控网络的理解还不够全面。粉质胚乳突变体和垩白突变体是研究淀粉合成分子机制和调控网络的理想材料。在粳稻品种W017和N2两个化学诱变突变体库中,分别筛选得到稳定遗传的胚乳粉质、皱缩突变体b381和胚巨大、胚乳垩白的突变体N2-52。前期已克隆到b381的突变基因,本文对b381的候选基因功能进行了研究,并对N2-52进行了表型分析和突变基因的精细定位。本文主要研究结果如下:1.突变体b381表现为胚乳粉质皱缩,且有两条缢痕。图位克隆证实目标基因为OsRpoTp,编码一个质体RNA聚合酶,亚细胞定位显示OsRpoTp分布在叶绿体。2.实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹分析表明,依赖核编码的质体RNA聚合酶(NEP)转录的质体RNA聚合酶(PEP)组分在转录水平和蛋白水平均降低。此外,b381突变体光系统功能基因psbA、psbD及cab表达下调,ATPase和NADH表达下调使呼吸途径受到抑制。3.对质体编辑位点和剪接位点分析发现,ndhA、ndhA-2、ndhB、ndhD、ndhG、rps14共六个位点的编辑效率改变,三个位点的剪接异常。4.酵母双杂实验共筛选出四个PPR蛋白和水稻MORF家族的两个蛋白与RpoTp互作。5.突变体淀粉合成途径酶中AGPS 2b蛋白量减少,SS Ⅱa、GBSSⅠ蛋白量增加。6.突变体N2-52成熟种子表现为胚巨大、垩白。突变体N2-52株高、种子垩白度、直链淀粉含量极显著高于野生型;结实率、千粒重极显著低于野生型;粒厚、脂肪含量显著低于野生型。扫描电镜观察N2-52垩白部分淀粉颗粒呈疏松的不规则排列。半薄切片观察发现N2-52造粉体分布疏松,且出现空泡。RVA分析显示N2-52胚乳淀粉的理化性质改变。7.利用N2-52和籼稻品种N22的F2定位群体,将突变基因定位于7号染色体短臂的一个42 kb的区域内,区间内共有五个开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)。对候选基因测序发现仅ORF3即已报道的GiantEmbryo(E,Os07g0603 700),在其编码区第二个外显子的第1529个碱基由C突变为A,导致了翻译的提前终止。8.蛋白质免疫印迹分析显示,在突变体中四个淀粉合成相关酶蛋白积累量下降,一个酶蛋白积累量增加,因此N2-52的淀粉合成途径异常。蔗糖合酶活性测定显示突变体N2-52的酶活性显著高于野生型。综上所述,本实验筛选到一个胚乳粉质皱缩及叶片白化突变体b381,对突变基因的功能进行研究,初步完成了其功能的阐述,同时筛选到六个互作蛋白,为下一步基因功能的深入研究奠定了基础。GE基因的突变可能造成了淀粉合成受阻,改变了淀粉颗粒的结构。
其他文献
学位
学位
学位
学位
学位
学位
大豆(Glycine max(L.)Merr.)原产于中国,是重要的蛋白及油料作物,而且其营养成分全面并可作为药用。株型是大豆最重要的性状之一,是影响光合利用率及耐肥抗倒能力的主要因素。大豆叶形态是株型性状的重要构成因素,叶片也是作物光合作用的主要场所,直接影响大豆有机物的积累,良好的叶片形态能充分利用光能,提高光合利用率,增加大豆产量。本研究拟通过正向遗传学和反向遗传学两种方法来挖掘控制大豆叶形
针对国有规模化农场对大型农业机械高质、高效、精准作业的需求,研究一种具有遥操作和自主导航功能的后装型拖拉机驾驶机器人,可模块化、快速、无损安装在拖拉机驾驶室内,实现拖拉机的智能化升级,有利于提高农机的智能化水平和农业生产效率。本论文主要研究内容和结论如下:(1)模块化拖拉机驾驶机器人的机械结构设计。基于拖拉机各执行机构的操作空间和参数,通过Solidworks软件进行拖拉机驾驶机器人结构设计,主要
癌症是现代医学中最具挑战性的问题之一。虽然近年来癌症的诊断与治疗方法有了很大的发展,但是癌症患者总体存活率仍然没有显著改善。脂质体具有良好的生物相容性,有助于提高难溶性药物溶解度、生物利用度与稳定性,并且可以实现控制释放的作用,在药物载体研究领域引起了广泛的关注。本论文以盐酸米托蒽醌为模型药,通过处方优化,制备了一种同时包裹盐酸米托蒽醌与PLGA纳米粒子的盐酸米托蒽醌脂质体,探讨了利用超声刺激控制
硒元素是人体维持正常机能的重要物质,能够预防多种疾病的发生,但过量的硒会对人体产生毒害作用。对植物而言,硒也是一种有益元素,硒过量同样产生毒害效应。硒超富集植物能够耐受高浓度的硒,它们具有吸收、同化大量硒的能力,可以利用这类植物将富集的硒为缺硒地区提供有机硒营养,因此研究硒超富集植物的硒耐受特性十分必要。本研究以硒超富集植物—壶瓶碎米荠(Cardamine hupingshanensis)为研究材