论文部分内容阅读
本试验以海水钝顶螺旋藻和银杏叶有效成分为材料，对螺旋藻多糖的提取、银杏叶提取物中银杏黄酮与银杏内酯的分离进行了研究，并将螺旋藻多糖与银杏叶有效成分复合，观察此复合制剂抑肿瘤、抗辐射的药理作用。获得如下研究结果:
1、螺旋藻多糖的提取
采用石油醚脱脂，超声波处理提取螺旋藻多糖，并用三氯乙酸沉淀蛋白质，探讨了浸提时间、浸提温度及浸提液pH对螺旋藻多糖提取的影响，得出了最佳提取工艺。其中最佳浸提时间为4h，最佳浸提温度为80℃，浸提液最佳pH为10。所得到的螺旋藻多糖含量在93％以上，蛋白质含量为5.96％。
2、银杏叶提取物中银杏黄酮与银杏内酯的分离
将银杏叶提取物溶于pH为14的碱性溶液中，再将10％HCl逐滴加入溶液中，逐步酸化。当溶液pH为6时银杏叶提取物中的银杏内酯完全析出。分别冷冻干燥沉淀与溶液，可分别得银杏内酯与银杏黄酮。
3、中、低剂量复合螺旋藻多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用
中剂量(100mg·kg-1·d-1)螺旋藻多糖与银杏叶有效成分（总黄酮含量≥24％、银杏内酯含量≥6％）按1∶1、2∶1和1∶2的比例复合分别灌服小鼠，观察对小鼠S180肉瘤的抑制作用。螺旋藻多糖与银杏叶有效成分1∶1比例复合组、2∶1比例复合组和1∶2比例复合组的抑瘤率分别比空白对照组提高39.436％(P＜0.05)、25.121％(P＜0.05)和36.680％(P＜0.05)。与空白对照组相比，试验组小鼠的脾指数、胸腺指数和外周白细胞数都无显著差异(P＞0.05)。中剂量螺旋藻多糖与银杏叶有效成分复合使用，对抑制小鼠S180肉瘤能产生协同增效作用，且对小鼠未见免疫损伤。
低剂量(50mg·kg-1·d1)螺旋藻多糖与银杏叶有效成分（总黄酮含量≥24％、银杏内酯含量≥6％）按1∶1、2∶1和1∶2的比例复合，分别灌服小鼠，观察对小鼠S180肉瘤的抑制作用。螺旋藻多糖与银杏叶有效成分1∶1比例复合组、2∶1比例复合组和1∶2比例复合组的抑瘤率分别比空白对照组提高62.281％(P＜0.01)、6.406％(P＞0.05)和42.709％(P＜0.05)。与空白对照组相比，所有试验组小鼠的脾指数、胸腺指数和外周白细胞数都无显著差异(P＞0.05)。
4、复合螺旋藻多糖对人结肠癌HT29细胞的抑制作用
螺旋藻多糖与银杏叶有效成分（总黄酮含量≥24％、银杏内酯含量≥6％）1∶1比例复合组、1∶2比例复合组和2∶1比例复合组对人结肠癌HT29细胞的抑瘤率，高剂量时分别比空白对照组提高68.04％(P＜0.01)、59.88％(P＜0.01)和58.82％(P＜0.01);中剂量时分别比空白组提高47.52％(P＜0.01)、51.98％(P＜0.01)和40.31％(P＜0.01);低剂量时分别比空白对照组提高39.70％(P＜0.01)、29.88％(P＜0.01)和27.31％(P＜0.01)。各复合制剂组的抑瘤率都高于相对应剂量的单一成分组，螺旋藻多糖与银杏叶有效成分联合使用对抑制HT29细胞能产生协同增效作用。
5、复合螺旋藻多糖对人白血病HL60细胞的抑制作用
螺旋藻多糖与银杏叶有效成分（总黄酮含量≥24％、银杏内酯含量≥6％）1∶1比例复合组、1∶2比例复合组和2∶1比例复合组对人白血病HL60细胞的抑瘤率，高剂量时分别比空白对照组提高62.30％(P＜0.01)、56.65％(P＜0.01)和58.59％(P＜0.01);中剂量时分别比空白组提高52.16％(P＜0.01)、49.14％(P＜0.01)和45.92％(P＜0.01);低剂量时分别比空白对照组提高44.62％(P＜0.01)、40.03(P＜0.01)和33.55％(P＜0.01)。各复合制剂组的抑瘤率都高于相对应剂量的单一成分组，螺旋藻多糖与银杏叶有效成分联合使用对抑制HL60细胞能产生协同增效作用。
6、复合螺旋藻多糖抗辐射作用
高剂量(200mg·kg-1·d-1)螺旋藻多糖与银杏叶有效成分（总黄酮含量≥24％、银杏内酯含量≥6％）按1∶1、2∶1和1∶2的比例复合。分别给昆明种小鼠灌服此三种复合制剂及螺旋藻多糖、银杏黄酮、银杏内酯三种单一成分。连续灌服14天后，用60Coγ-射线全身照射，照射后继续灌服16天。与空白组相比，螺旋藻多糖与银杏叶有效成分1∶1比例复合组、2∶1比例复合组、1∶2比例复合组、螺旋藻多糖组、银杏黄酮组和银杏内酯组平均存活天数分别提高了4.0(P＜0.01)、3.7(P＜0.01)、3.3(P＜0.01)、2.3(P＜0.05)、2.5(P＜0.01)、2.6(P＜0.01);存活率分别提高80％、60％、40％、20％、30％、20％。
中剂量(100mg·kg1·d-1)和低剂量(50mg·kg-1·d-1)螺旋藻多糖与银杏叶有效成分（总黄酮含量≥24％、银杏内酯含量≥6％）按1∶1、2∶1和1∶2的比例复合。分别给昆明种小鼠灌服此复合制剂及螺旋藻多糖、银杏黄酮、银杏内酯三种单一成分。连续灌服14天后，用60Coγ-射线全身照射，照射后继续灌服16天。与对照组相比，中、低螺旋藻多糖组、银杏黄酮组和银杏内酯组平均存活天数分别提高了2.8(P＜0.01)、2.2(P＜0.01)、3.0(P＜0.01)、2.5(P＜0.01)、0.5(P＜0.05)、2.6(P＜0.01)，存活率分别提高30％、10％、40％、20％、10％、20％。
与对照组相比，中、低剂量螺旋藻多糖与银杏叶有效成分1∶1比例复合组、2∶1比例复合组、1∶2比例复合组、平均存活天数分别提高了3.7(P＜0.01)、3.8(P＜0.01)、2.6(P＜0.01)、3.6(P＜0.01)、2.4(P＜0.01)、3.6(P＜0.01)，存活率分别提高60％、70％、20％、50％、30％、60％。