目的:采用胶原海绵为支架,以新生大鼠心肌细胞为种子细胞构建工程化心肌组织。内容:提取鼠尾胶原,制备胶原海绵支架。新生大鼠心肌细胞的获取研究。测出用BrDU抑制成纤维细胞增殖时所需的合适浓度。工程化心肌组织的构建。方法:用冻干的方法将胶原溶液制成胶原海绵支架,进行热交联处理,对其用扫描电镜观察。用胰酶和胶原酶消化法从1～2d新生大鼠的心肌组织中分离心肌细胞,用细胞计数法测出不同的消化酶分离所得的心肌细胞数量。用倒置显微镜观察心肌的形态、搏动状态,对其进行组织学检查。用细胞计数法测定成纤维细胞在BrDU作用下的增殖曲线。新生大鼠心肌细胞种植到胶原海绵支架上,对其进行HE染色切片观察和扫描电镜观察,将其与天然心肌组织作对比。结果:制得的胶原海绵支架具有多孔结构,并且经过热交联处理后,多孔结构得到保持,同时降解速率显著降低。用胰酶和胶原酶同时分离所得的心肌细胞数量较多,而且具有较好的活性,在培养的第3d开始自发搏动,以后相互连接成簇,趋于同步收缩。在BrDU的浓度为0.13至0.16mmol/L时,成纤维细胞增殖明显得到抑制。构建出工程化心肌组织能够自发跳动。结论:使用胶原海绵支架和新生大鼠心肌细胞体外构建出了能跳动的工程化心肌组织。工程化心肌组织与天然心肌组织有十分相似的结构。