“生殖健康”是WHO在1988年提出的一种人类健康新理念。近年来，随着人类辅助生殖医学领域探索的不断深入，男性生殖健康问题得到了社会的全面关注。人巨细胞病毒(HumanCytomegalovirus，HCMV，简称CMV)也称人疱疹病毒5型，属于疱疹病毒科β疱疹病毒亚科。作为一种机会致病原，CMV常于潜伏状态广泛存在于世界各地不同人群的各种体细胞内。据统计，约世界人口的50％以上都有CMV感染史，当机体免疫功能下降或受抑制时，CMV感染易被激活，引发机体各大脏器不同程度的病理损害，严重影响生命质量。由于生殖系统CMV感染能对胚胎及新生儿造成严重不良后果，近年来CMV对生殖系统的感染机制与防治研究受到生殖医学领域许多学者的广泛重视。 为此，本课题从生殖医学领域出发，设立四部分内容，旨在系统、深入地探讨CMV感染对雄性生殖功能的近、远期具体影响，并从分子生物学、生殖生物学等角度研究CMV感染致病的可能分子机制。 第一部分小鼠睾丸鼠巨细胞病毒感染模型的建立及病毒M83mRNA在感染睾丸中的表达与组织病变的相关性 目的 建立雄鼠睾丸鼠巨细胞病毒(murinecytomegalovirus，MCMV)感染模型，探讨小鼠MCMV感染的不同时期(一个生精周期内)，MCMVM83基因mRNA在小鼠睾丸中的表达与睾丸组织病变程度的相关性。 结论 小鼠睾丸MCMV感染模型成功建立。睾丸MCMV感染时，MCMVM83基因的mRNA水平与睾丸感染病变程度呈正相关；提示：对MCMVM83mRNA动态检测可估计感染组织的预后。 第二部分巨细胞病毒感染对精子功能影响的体内、体外实验研究 目的 通过体内动物实验及体外感染实验，探讨CMV感染对小鼠精子计数、活动力、存活率、顶体反应、膜功能及人精子存活率和体外运动参数的影响。 结论 小鼠睾丸MCMV早期急性感染可造成精子存活率、精子顶体反应与膜功能的显著下降，但在一个生精周期内，随感染时间延长，精子上述功能恢复正常；提示CMV感染可能短暂性地影响生育。此外，HCMV体外感染人精子的实验研究发现，HCMV体外感染3～4h可造成精子存活率与一些运动参数及精子超微结构的异常，且这种改变与HCMV浓度存有一定的量效关系，高浓度HCMV感染对精子功能与超微结构的影响显著。 第三部分巨细胞病毒感染对雄鼠生殖功能近期影响的分子机制 目的 从分子生物学、生殖生物学、细胞生物学等角度出发，研究MCMV感染对雄鼠生殖功能近期(一个生精周期内)影响的分子机制。 结论 MCMV急性感染可通过诱导生殖细胞凋亡、增加其凋亡率来影响雄鼠的生殖功能，且精子的凋亡可能受精子线粒体功能的调控。 睾丸组织内凋亡调控基因Bcl-2与Bax在感染所致的生殖细胞凋亡的基因调控中起着十分重要的作用。Bcl-2促进细胞凋亡，Bax则抑制细胞的凋亡。 MCMV感染还通过导致小鼠下丘脑-垂体-性腺轴的调节紊乱来影响小鼠的生殖功能。MCMV急性感染期睾丸组织T水平降低，血清LH水平升高。 MCMV急性感染还可使生殖防御系统启动，其中，HSP70在维持及修复睾丸组织正常的结构和生精功能中起着十分重要的作用，具有拮抗MCMV感染致睾丸组织病变作用及抑制生殖细胞凋亡的生物学作用。而在MCMV感染的不同时期，NF-κBp65发挥着不同的生物学作用：在感染的最早期，核转录因子NF-κBp65可抑制睾丸生殖细胞凋亡，拮抗MCMV感染引起睾丸组织损伤；而随感染时间延长，MCMV活动增殖，NF-κBp65则可能通过诱导Bcl-2表达来加重生殖细胞的凋亡，导致组织损伤，功能障碍。 第四部分巨细胞病毒感染对雄鼠生殖功能的远期影响及其可能的作用机制 目的 研究MCMV感染对雄性小鼠生殖功能的远期影响，初步探讨MCMV感染导致雄鼠生殖功能异常的可能作用机制。 结论 睾丸MCMV感染可对雄鼠生殖功能产生不良的远期影响：MCMV感染3个月后，除导致一些脏器的不可逆损害外，还可使雄鼠的生育力显著下降，但雄鼠的交配能力与孕鼠的妊娠结局并不受影响。MCMV感染导致雄鼠生育力下降的主要作用机制可能为：MCMV直接侵入及其代谢产物直接损伤生精细胞，致精子发生障碍，并影响附睾精子成熟过程中运动能力的获得和发育，从而使精子计数、精子活动力与存活率下降，影响精子数量和质量，导致生殖功能障碍。