乙酰孕激素是一类合成类固醇药物,主要用于提高饲料利用率和抑制发情。但是,人食用含有乙酰孕激素类药物的动物性产品后可造成体内激素代谢紊乱,引发疾病。我国是畜产大国,居民对牛羊肉等动物源性产品的需求量很大,伴随而来的是动物源性产品中乙酰孕激素的安全问题。长期食用含有微量乙酰孕激素的动物产品,也会对人体造成显著危害。目前我国现行的标准中,仅规定了牛奶和奶粉以及牛和猪脂肪中醋酸美仑孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲羟孕酮的检测方法。国内外对乙酰孕激素的研究相对较少,且多集中于乙酰孕激素在脂肪中的残留检测。本试验拟研究建立鸡、牛、羊的肌肉,鸡、羊的肾脏及猪脂肪中醋酸氟孕酮、醋酸甲地孕酮、醋酸美仑孕酮、醋酸甲羟孕酮、醋酸氯地孕酮、醋酸羟孕酮六种乙酰孕激素的多残留检测方法,为实际监测工作提供参考。试样经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶水解,乙腈溶液提取,经冷冻离心除脂,增强型除脂固相萃取柱（EMR）净化,超高效液相色谱-串联质谱测定,基质匹配标准溶液外标法定量。在0.5～10 ng·m L^-1浓度范围内,六种乙酰孕激素线性均良好,相关系数均不低于0.99。鸡、牛、羊的肌肉,鸡、羊的肾脏及猪脂肪中的检出限为0.2ng·g^-1(醋酸甲羟孕酮为0.4 ng·g^-1)。鸡、牛、羊的肌肉,鸡、羊的肾脏及猪脂肪中的定量限为0.5 ng·g^-1(醋酸甲羟孕酮为1 ng·g^-1)。六种乙酰孕激素在鸡、牛、羊的肌肉,鸡、羊的肾脏及猪脂肪中的平均回收率均在60%～120%之间。批内相对标准偏差≤15%,批间相对标准偏差≤20%。本方法简便、准确、灵敏,适用于鸡、牛、羊的肌肉,鸡、羊的肾脏及猪脂肪中乙酰孕激素多残留的分析检测。