【摘 要】
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目的①研究中药黄芩苷(Baicalin)对人髓系白血病细胞株HL-60细胞增殖、凋亡、分化的影响。②观察黄芩苷对HL-60细胞增殖、凋亡相关基因及蛋白表达水平的影响,探讨其作用机制
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目的①研究中药黄芩苷(Baicalin)对人髓系白血病细胞株HL-60细胞增殖、凋亡、分化的影响。②观察黄芩苷对HL-60细胞增殖、凋亡相关基因及蛋白表达水平的影响,探讨其作用机制。③黄芩苷对HL-60细胞作用后PI-3K/Akt信号转导通路中蛋白表达的变化。方法应用MTT法绘制细胞生长曲线、细胞克隆形成实验观察黄芩苷对HL-60细胞增殖的影响;DNA倍体分析、Annexin V/PI双染流式细胞检测、末端缺口原位标记(TUNEL)法及DNA凝胶电泳分析细胞凋亡及细胞周期变化;NBT还原实验和细胞表面CD11b、CD33抗原检测黄芩苷诱导HL-60细胞分化能力;RT-PCR检测黄芩苷作用前后c-myc、bcl-2、h-TERT、pim-2、P21、Mcl-1基因mRNA表达水平的变化,蛋白印迹法(Western-Blot)检测c-myc、bcl-2、h-TERT和caspase-3蛋白以及Akt、mTOR和NF-ΚB蛋白表达水平的变化。结果细胞生长曲线及克隆形成实验结果示黄芩苷能明显抑制HL-60细胞增殖,半数抑制浓度(IC50)约为20μmol/L; DNA片段化、亚G1峰(凋亡峰)、TUNEL凋亡细胞的检出及Annexin V/PI双染流式细胞检测等证实黄芩苷能有效诱导HL-60细胞凋亡,细胞凋亡率在一定的药物浓度范围内(10～40μmol/L)与药物作用浓度和作用时间呈正相关。NBT还原实验和细胞表面CD11b、CD33抗原检测结果提示黄芩苷能诱导HL-60细胞分化成熟。黄芩苷作用后HL-60细胞c-myc、
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