目的　　多关于醛固酮导致肾脏纤维化相关方面的研究成果都提示:醛固酮可能作为一个独立的危险因素直接参与肾脏损害。目前认为醛固酮肾损伤是多种途径共同作用的结果，其中醛固酮诱导肾小管上皮细胞发生上皮间充质转分化(epithelialmesenchymaltransition，EMT)，使肾小管上皮细胞先转变成为肌成纤维细胞(myofibroblast，Myof)，再转变成为成纤维细胞，是促进肾间质纤维化是重要的途径之一。　　我们先前的研究发现:在醛固酮作用下，小鼠出现大量蛋白尿及肾脏纤维化的同时伴有Rho激酶活性增强，应用Rho激酶抑制剂抑制Rho激酶活性，在不影响血压的情况下，减轻了醛固酮诱导的肾损伤，说明其有不依赖于降低血压的肾脏保护作用。有研究发现RhoA和它的下游效应因子Rho激酶参与体外高糖刺激诱导小鼠肾小管上皮细胞EMT中的部分过程，进而促进α-SMA启动子的激活。然而在体外醛固酮诱导的人近端肾小管上皮细胞EMT过程中，Rho激酶是否介导了这一过程，目前尚无相关报道。　　本次实验利用体外醛固酮刺激人近端肾小管上皮细胞，给予醛固酮受体拮抗剂螺内酯，Rho激酶抑制剂Y-27632干预，观察Rho激酶是否介导了醛固酮诱导体外人近端肾小管上皮细胞HK2发生EMT这一过程。　　方法　　美国ATCC细胞库，HK2细胞系为实验对象。　　将人HK2细胞分为4组:正常对照组，醛固酮组，醛固酮+螺内酯组，醛固酮+Y-27632组。相差显微镜下观察细胞形态变化。采用WesternBlot免疫印迹法检测上皮细胞标志蛋白E-cadherin，纤维化标志蛋白α-SMA，Rho激酶下游底物活性标志蛋白MYPT-1表达。　　结果　　1、细胞形态学改变:　　对照组:HK2细胞为圆形或椭圆形铺路石样形态。　　醛固酮组:失去圆形及铺路石样形态，变成了形状杂乱的长梭形的成纤维形态。　　醛固酮+螺内酯组及醛固酮+Y-27632组:HK2细胞形态介于对照组与醛固酮组两者之间。　　2、WesternBlot条带分析显示:与对照组相比，醛固酮组HK2上皮细胞标志蛋白E-cadherin表达明显减少，纤维化标志蛋白α-SMA表达明显增多，差异有统计学意义。且E-cadherin和α-SMA的表达变化对醛固酮刺激呈浓度及时间依赖，螺内酯和Y-27632可分别减轻这一过程。同时发现，醛固酮组Rho激酶下游标记物MYPT-1蛋白表达明显增加，螺内酯或Y-27632预孵后的HK2细胞再给予同样醛固酮刺激，MYPT-1表达较醛固酮组减少，螺内酯组减少更明显，差异有统计学意义。　　结论　　固酮可以诱发人近端肾小管上皮细胞发生EMT，且呈浓度及时间依赖性。在醛固酮诱导HK2发生EMT的过程中，伴有Rho激酶的激活，提示Rho激酶可能介导了醛固酮诱导HK2发生EMT这一过程。