【摘 要】
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目的：本实验旨在研究基质金属蛋白酶抑制剂GM6001在准分子激光角膜上皮下磨镶术(LASEK)术后角膜损伤修复中的作用,探讨LASEK术后角膜愈合的机制。方法：(1)GM6001(基质金属蛋白
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目的：本实验旨在研究基质金属蛋白酶抑制剂GM6001在准分子激光角膜上皮下磨镶术(LASEK)术后角膜损伤修复中的作用,探讨LASEK术后角膜愈合的机制。方法：(1)GM6001(基质金属蛋白酶抑制剂)眼液的制备(2)建立兔LASEK模型(3)27只新西兰白兔(54只眼)术后随机分3组,每组6只兔,分别为基质金属蛋白酶抑制荆(GM6001)组、氟美童(Fluoromethalone,FML)组和阴性对照(negative control,NC)组。分别于术后0.5月、1月、2月共3个时间点在裂隙灯下对兔角膜进行Haze评估并记录分级,各组随机选取3只兔行角膜共聚焦显微镜检查,随后处死取角膜组织固定后分别行光镜、透射电镜观察,Ⅲ型胶原免疫组织化学法检测。结果：1、裂隙灯显微镜观察：术后0.5月和1月,Haze分级水平组间比较差异均有统计学意义(P<0.01),GM6001组和FML组Haze分级水平明显低丁NC组(P<0.01),但GM6001组和FML组相比,筹异无统计学意义(P>0.05)；术后2月组间整体比较差异无统计学意义(P>0.05)。2、角膜组织病理切片：兔LASEK术后不同时间点各组光镜下均见角膜上皮层明显增厚,上皮细胞呈6-7层,与NC组相比,GM6001组和FML组术区角膜前部基质内出现少量角膜基质细胞聚集。3、角膜Ⅲ型胶原免疫组织化学法：正常兔角膜基质Ⅲ型胶原为阴性表达；NC组角膜Ⅲ型胶原早强附性表达；GM6001组角膜Ⅲ型胶原呈弱阳性表达；FML组角膜Ⅲ型胶原呈阳性表达。4、角膜超微结构观察：与NC组和FML组相比,GM6001组前基质成纤维细胞较较少,角膜基质层胶原纤维粗细均匀且排列整齐规则,成纤维细胞体积小,细胞器含量少,细胞较稳定。5、角膜共聚焦显微镜观察：兔LASEK术后各时间点GM6001组与其他两组比较前基质内的细胞排列较规则。前基质细胞数量统计学分析,GM6001组术区前部基质内角膜细胞数与NC组和FML组相比,差异有统计学意义(P<0.01),后两组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论：GM6001通过抑制角膜基质细胞的增生及Ⅲ胶原纤维的合成,减少haze的形成,其疗效与FML相似。兔LASEK术后Haze形成的机制与手术损伤后引起角膜内MMPs的释放增加,诱发角膜基质内角膜细胞活化增殖,新生胶原纤维排列紊乱有关。
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