基于纳米酶标记仿生免疫分析检测磺胺嘧啶的方法研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ljc20090204
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磺胺类药物是一种抗菌效果好且价格低廉的广谱类抗生素,在畜牧生产养殖中应用十分广泛。由于磺胺药物的滥用以及在人体、动物和环境中的残留,对人体健康造成了严重的威胁。为了防止药物残留对人类带来危害,迫切需要一种快速、灵敏的磺胺药物分析检测方法。仿生酶联免疫分析方法是近几年国内外研究的热点,该方法是以仿生抗体为基础,并结合了酶的催化放大作用,但由于天然酶的分子量大且稳定性差,制约了其在仿生免疫分析中的应用。近年来,纳米材料模拟酶由于具有天然酶的催化活性,且性质稳定,在免疫分析检测中代替天然酶作为标记物,具有较好的应用前景。本研究以分子印迹聚合物作为识别的仿生抗体,用纳米酶代替辣根过氧化物酶(HRP)作为标记物,建立了两种检测磺胺嘧啶残留的新型方法。主要研究结果如下:(1)基于Au@SiO2纳米酶标记仿生免疫分析检测磺胺嘧啶方法。以磺胺嘧啶为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,采用本体聚合法在96孔酶标板上制备了分子印迹膜作为仿生抗体,以制备的Au@SiO2纳米模拟酶作为标记物,建立了一种快速检测磺胺嘧啶的纳米酶标记仿生免疫分析方法。在最佳条件下,该方法的最低检出限(IC15)为0.2 mg L-1。对牛肉样品进行添加回收实验,回收率为78.00%-90.96%。该方法用于检测猪肉和鸡肉样品中磺胺嘧啶的残留,检测结果与国标液相色谱法无显著性差异。(2)基于Au@Pt@SiO2双金属纳米酶标记仿生免疫分析检测磺胺嘧啶方法。本实验以制备的分子印迹聚合物作为仿生抗体,以高活性的Au@Pt@SiO2双金属纳米酶作为标记物,建立了一种快速检测磺胺嘧啶的新型仿生免疫分析方法。在最佳条件下,该方法的检出限(IC15)和灵敏度(IC50)分别为0.09 mg L-1和6.1 mg L-1。使用该方法对蜂蜜和牛奶样品进行添加回收实验,回收率在70.8-90.2%之间。该方法用于奶粉和奶类样品中磺胺嘧啶残留量的定量分析,与国标液相色谱法测定结果无显著性差异。
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