【摘 要】
:
芳香族氨基酸羟化酶(AAAH)对芳香族氨基酸代谢具有重要的生理作用。芳香族氨基酸羟化酶家族包括苯丙氨酸经化酶(PAH)、色氨酸羟化酶(TPH)和酪氨酸羟化酶(TH)。苯丙氨酸羟化酶广泛分布于动物、植物和微生物中,是苯丙氨酸代谢的关键酶和限速酶,催化L-苯丙氨酸转变成L-酪氨酸,是哺乳动物体内苯丙氨酸正常分解代谢唯一途径的限速步骤。人类PAH基因与重要代谢疾病苯丙酮尿症密切相关。在昆虫中,果蝇PAH
论文部分内容阅读
芳香族氨基酸羟化酶(AAAH)对芳香族氨基酸代谢具有重要的生理作用。芳香族氨基酸羟化酶家族包括苯丙氨酸经化酶(PAH)、色氨酸羟化酶(TPH)和酪氨酸羟化酶(TH)。苯丙氨酸羟化酶广泛分布于动物、植物和微生物中,是苯丙氨酸代谢的关键酶和限速酶,催化L-苯丙氨酸转变成L-酪氨酸,是哺乳动物体内苯丙氨酸正常分解代谢唯一途径的限速步骤。人类PAH基因与重要代谢疾病苯丙酮尿症密切相关。在昆虫中,果蝇PAH基因与表皮硬化、眼色素合成以及神经活动有关,埃及伊蚊PAH基因与防御免疫黑化有关。拟黑多刺蚁作为社会性昆虫模式生物的代表,研究PAH基因,有助于阐明苯丙氨酸代谢在拟黑多刺蚁生命活动中承担的生理作用和生物学功能,对进一步研究拟黑多刺蚁的经济价值和药用价值具有重要的意义,同时,对人类苯丙酮尿症(Phenylketonuria, PKU)病的治疗也具有参考价值。色氨酸羟化酶是5-羟色胺(5-HT)合成的限速酶和关键酶,其活性的高低直接决定着神经元内5-HT的含量,色氨酸羟化酶是确定5-HT能神经元的最好标志。5-HT广泛存在于脊椎动物和无脊椎动物的神经系统,参与多种行为和发育的调节。临床上,TPH基因的多态性伴随多种心理障碍疾病。昆虫中,关于TPH基因的研究报道很少,仅果蝇中有相关研究。拟黑多刺蚁作为社会性动物的模式昆虫,研究PvTPH不仅是了解拟黑多刺蚁中5-HT神经递质系统及其作用方式的必要内容,对其它昆虫5-HT递质系统的研究也具有重要的价值。拟黑多刺蚁Polyrhachis vicina Roger隶属膜翅目(Hymenoptera),蚁科(Formicidae),多刺蚁属(Polyrhachis),是典型的社会性昆虫。该种昆虫具有独特的品级分化、行为复杂、分工明确等社会性特征,是研究昆虫发育及行为调控机制方面的很好材料。基于上述理由,本论文对拟黑多刺蚁中苯丙氨酸羟化酶基因(PvPAH)和色氨酸羟化酶基因(PvTPH)进行了克隆、表达及发育相关性研究,主要结果如下:1.拟黑多刺蚁苯丙氨酸羟化酶基因全长为1670bp,编码区长1344bp,共编码447个氨基酸。5’-UTR为87bp,3’-UTR为239bp。将获得的核酸序列命名为PvPAH,上传至GenBank,得到的序列号为JQ782583。2.拟黑多刺蚁色氨酸羟化酶基因全长为1956bp,编码区长1620bp,编码539个氨基酸。其中5’-UTR为108bp,3’-UTR为228bp。将获得的核酸序列命名为PvTPH,上传至GenBank,得到的序列号为KC600559。3.PvPAH经生物信息学分析,得出相对分子量为51237.0Da,理论等电点pI=6.12,没有信号肽,属于亲水性的非分泌型蛋白;该蛋白具有芳香族氨基酸羟化酶家族所特有的生物喋呤依赖氨基酸羟化酶位点;该蛋白的二级结构是mix型:与该蛋白三级结构最匹配的模板是DIMER(2.00A);该蛋白与意大利蜂同源性相似度高达87%,与其他昆虫的序列相似度高达75%,与脊椎动物的序列相似度达到60%;该蛋白的分子进化关系与物种进化基本保持一致。4.PvTPH经生物信息学分析,得出相对分子量为61590.3Da,理论等电点pI=5.33,没有发现信号肽,也属于亲水性的非分泌型蛋白;该蛋白属于ATC结构域的非血红素铁离子依赖的芳香族氨基酸羟化酶家族,有生物喋呤依赖的氨基酸羟化酶位点;该蛋白的二级结构为mix型;与其最匹配的三级结构模板是MONOMER(1.71A);该蛋白的同源性与意大利蜂相似度高达88%,与其他昆虫的序列相似度高达70%,与脊椎动物的序列相似度达到60%;该蛋白的分子进化关系与物种进化也基本保持一致。5.运用RQ-PCR技术研究PvPAH mRNA的定量表达,结果表明:该基因在拟黑多刺蚁各个发育阶段和各个品级中均有表达,但表达量有着明显的差异。推测是因为苯丙氨酸羟化酶是合成黑色素的关键酶,而黑色素在昆虫免疫防御机制中扮演着重要的角色。从卵期到成体,随着个体体积的增加,表皮中黑色素的合成量增多,所以苯丙氨酸羟化酶基因的表达量增加。在成体中,推测工蚁复杂的社会分工与防御机制有关,因此,它的表达量最高。6.色氨酸羟化酶是合成5-羟色胺的关键酶,5-羟色胺是重要的神经递质,参与动物的学习记忆行为。运用RQ-PCR技术研究PvTPHmRNA的定量表达,结果表明:从卵期到三龄幼虫期,该基因的表达量呈现递增趋势,推测与神经组织的发育有关;到四龄幼虫期表达量降低,可能是由于该时期神经发育基本完成;在蛹期突然急剧增加,推测是因为完全变态昆虫在蛹期发生中枢神经系统的重建;在成虫中,工蚁的表达量最高,其次是雄蚁,推测与工蚁复杂的行为活动有关,雄蚁在求偶过程中需要更多的视觉信息和空间辨别能力,因此雄蚁中PvTPH mRNA的表达量比雌蚁高。
其他文献
熟知,Sturm-Liouville(S-L)理论起源于固体热传导模型.其应用已涉足于数学物理、工程技术、地球物理和气象物理等各类应用及理论学科.并且该理论的研究一直受到众多数学家及物理学家的关注.本文主要考虑S-L系统的谱与其逆问题,在前人研究成果的基础之上,从新的角度进一步研究S-L系统的谱特性及其在逆问题中的应用.具体地,本文研究的内容主要有:第一章绪论.主要介绍S-L理论的研究状况及本文所
Langmuir-Blodgett膜(简称LB膜)是一种新型的单分子膜技术,各国研究人员都热衷于LB膜的研究。LB膜技术实现了对单分子膜在分子水平上的操纵,LB膜由于金属离子的引入而具有了更广泛的潜在应用价值。两亲分子之间的作用会由于亚相中的金属离子与两亲分子亲水头基的相互作用而发生改变,并且单分子膜的成膜强度、成膜能力、单分子膜的结构和形貌等也会受这种相互作用的影响,其中两亲分子的亲水头基是造成
在生态学中,物种动力学行为分别由微分方程描述的连续时间模型和由差分方程描述的离散时间模型来刻画,且时滞和外界的干扰对生物种群密度的变化有着较大的影响.本文主要讨论了具有离散和连续时滞的Host-Parasitoid模型和具有食物限制和扰动的离散时间捕食-被捕食模型两类生态模型解的渐近性,主要包含了模型解的渐近稳定性、Hopf分支、Flip分支以及Neimark-Sacker分支的存在性和稳定性等问
目前,对于狭域分布的物种的遗传多样性的研究多以植物材料为研究对象,并且多数研究结果认为,相近的物种中,狭域分布的物种比广泛分布的物种的种内遗传多样性要低;也有研究显示出了相反的结果,即狭域分布的特有物种具有中等到高等的遗传变异。然而,对于狭域分布的动物的遗传多样性的研究较少,本论文以六盘齿突蟾为研究对象,试图探讨狭域分布的六盘齿突蟾的遗传多样性,种群动态历史。六盘齿突蟾(Scutiger liup
脑科学是21世纪生命科学中的重要领域,神经网络的工作方式是脑科学研究的核心内容之一。其中,神经网络对节律性运动的调节是近几年来研究的热点问题之一。在对神经网络调节运动模式进行研究的初级阶段,相比于大脑内部复杂的神经网络,中枢模式发生器(central pattern generator; CPG)这种相对较小的网络受到大量学者的关注。CPG是指在缺少感觉输入和时间信息编码输入的前提下仍能产生节律性
在对啮齿类的研究工作中发现早期社会应激会对啮齿类的大脑和行为产生长期并且持续的负面影响。但是非常有趣的是,现有研究已经显示这些影响中的一部分有可能被触觉刺激逆转。例如:实验发现在新生儿隔离期间伴有新生儿触觉刺激处理可以逆转或阻止新生儿隔离对成年后行为,情绪等方面的影响,并且还发现新生儿触觉刺激效应有性别差异。然而现有研究对新生儿触觉刺激是否可以逆转或改变由早期隔离引起的非空间学习记忆,社会性及神经
中国大鲵(Andrias davidianus)简称大鲵,是我国特有的有尾两栖类,也是全球现存两栖类中体形最大、寿命最长的古老动物,素有“活化石”之称。本文以秦岭南坡仿生态环境下养殖的大鲵为研究对象,在2011年7-8月采用全事件记录法、随机取样法、焦点动物取样法和瞬时扫描取样法分别对其繁殖前期的夜间活动节律、行为谱、行为时间分配以及影响其出洞活动的环境因子等进行了观察研究,旨在揭示大鲵繁殖前期的
氟是一种最基本的微量元素,主要存在于大气、水、土壤、煤炭以及食品中,在医学和工业中都涉及到氟。由于氟化学性质活泼,主要以F离子为主,F离子可以与其它元素结合形成有机和无机氟化物。氟化物是防止龋齿发生的主要物质。氟化钠是最常见的可溶性氟盐,容易释放出F离子。虽然适量的氟离子对动植物乃至人体有益,但过量氟的摄入就会产生毒性效应。随着工业的发展,人类生产活动造成了大量氟化物的产生,如金属冶炼,砖、陶瓷、
人凝血因子Ⅶ在肝脏内合成,是一种参与凝血过程的重要单链糖蛋白。当组织发生破损的时候血液中的组织因子(TF)暴露出来,FⅦ通过与其相结合形成TF-FⅦ复合物而激发外源性凝血途径,同时内源性凝血途径的启动也受到FⅦ的调控。凝血因子Ⅶ在治疗先天性和获得性FⅦ缺乏疾病、带有FⅧ和FⅨ抑制物的血友病、血小板功能性障碍和血小板减少疾病,以及外科及严重意外创伤的止血等方面具有十分广泛的应用。然而,FⅦ属于血浆微
邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate, DEHP)属于邻苯二甲酸酯类化合物(phthalic acid esters, PAEs),是一种重要的酯类环境雌激素,可导致脊椎动物生殖功能下降,能够扰乱生物机体内正常的内分泌生殖功能。类固醇激素合成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein, StAR)、细胞色