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微球是指药物分散或被吸附在高分子、聚合物基质中形成的微粒分散体系,粒径范围一般为1-500μm,也可达到纳米级别的,一般制成混悬剂型供注射或者口服使用,可提高难溶性药物的溶解性。通常粒径分布均一的微球能提高批次间载药量、体外释放行为和体内药效的重复性,最大程度的富集于靶部位。目前传统的乳化方法如机械搅拌法、均质乳化法很难控制微球的粒径大小及分布,而SPG膜乳化法则能有效的解决这个难题,该方法在制备可控粒径大小及均一粒径分布的微球上具有明显的优势。实验目的本课题组利用SPG膜乳化技术已成功制备出粒径分布均一、高载药量及包封率且具有肺部靶向作用的汉防己甲素-聚乳酸(PLA)微球,在本课题组的长期研究基础下,选择丹参酮ⅡA与汉防己甲素的配伍,以达到协同作用来治疗矽肺,并降低汉防己甲素注射液的刺激性及肝损伤反应,但是汉防己甲素与丹参酮ⅡA均属于水难溶性药物,口服生物利用度小,半衰期短,而丹参酮ⅡA通常临床上用其磺酸盐注射液用来治疗心血管疾病,但药理研究表明丹参酮ⅡA磺酸盐与丹参酮ⅡA的药理作用不完全一样,本课题在不改变丹参酮ⅡA结构的前提下,将汉防己甲素与丹参酮ⅡA构建于同一载体中,旨在制备出汉防己甲素-丹参酮ⅡA复合微球,以期改善两者的溶解性并能在发挥协同促进作用的同时,实现将方剂从“复杂-简单-复杂”方向的分解与整合。实验方法在单因素考察的基础上,结合SPG膜乳化技术制备丹参酮ⅡA微球,以丹参酮ⅡA微球的平均粒径、粒径分布、载药量与包封率为评价指标,利用响应面法优化丹参酮ⅡA微球制备工艺,进而优化出汉防己甲素-丹参酮ⅡA复合微球的制备工艺。用扫描电子显微镜、马尔文粒度分析仪、傅里叶红外色谱仪、DSC204差示扫描量热仪、XRD-6000型智能X射线衍射仪等仪器对微球的表面性质及药物在微球中的分布状态进行研究。利用气相色谱仪考察该复合微球中有机溶剂的残留量,紫外分光度计测定乳化剂和稳定剂的残留量,最后考察其体外释放实验、在大鼠体内的药代动力学和组织分布实验。实验结果SPG膜乳化技术在优化工艺下制备的丹参酮IIA-PLGA微球的平均粒径为2.338μm,PDI指数为0.328,载药量为1.20%,包封率为89.57%；而汉防己甲素-丹参酮IIA-PLGA微球平均粒径为2.787μm,PDI指数为0.164,综合载药量为7.85%(其中汉防己甲素的载药量为7.21%,丹参酮ⅡA的载药量为0.64%),包封率为82.59%(其中汉防己甲素的包封率为88.55%,丹参酮ⅡA的包封率为46.86%)。对汉防己甲素-丹参酮IIA-PLGA微球进行相关表征发现汉防己甲素和丹参酮ⅡA在微球中均是以非晶形状态存在且高度分散在该载体中；体外释放实验结果表明该复合微球在24h内的总累积释放量仅为6.21%,17d内总累积释放率达到84.10%(其中,汉防己甲素在24h内的累积释放量仅为6.44%,17d内的累积释放率达到了89.02%,而丹参酮ⅡA在24h内的累计释放量3.60%,17d内的累积释放率仅达到21.24%),且该制剂的体外释药过程符合Riger-Peppas模型。同时该复合微球中二氯甲烷的残留量为87.9ppm(远小于中国药典2010版的标准600ppm),聚乙二醇4000的残留量为0.22%,聚乙烯醇的残留量为0.24%。大鼠尾静脉分别注射相同剂量汉防己甲素-丹参酮IIA-PLGA微球与原料药组后,大鼠体内药代动力学实验结果没有显著性差异；但组织分布实验发现,微球组在大鼠肺部的汉防己甲素浓度比原料药组的浓度高,且明显的缓释作用,在0.25,1,2,8,24h时微球组的浓度分别是原料药组的0.12、1.56、4.76、8.48、9.07倍,且24h后原料药组的汉防己甲素就已经检测不到,而微球组48h后仍能检测到汉防己甲素；同样,微球组在大鼠肺部的丹参酮ⅡA浓度也比原料药组的浓度高,且明显的缓释作用,在0.25,1,2,8,24h时微球组的浓度分别是原料药组的0.20、3.16、4.53、6.08、5.96倍。实验结论SPG膜乳化技术在制备汉防己甲素-丹参酮IIA-PLGA复合微球上也是可行的,可实现两者的同步作用,制备出的微球粒径均一、包封率高、安全低毒,体外释放可降低突释,具有明显的缓释作用,体内具有潜在的肺靶向作用,本研究成果可以延伸应用到其他中药抗肿瘤复方制剂中,为实现中药复方制剂的在微粒给药系统上的应用提供了新的思路和方法。