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日粮蛋白水平是制约泌乳反刍动物乳产量及乳蛋白水平的关键因素之一。但反刍动物氮利用效率低下,大量日粮氮不能被机体利用而随粪尿排出体外,造成了严重的资源浪费与环境污染。降低日粮蛋白水平是提高反刍动物氮利用效率最直接的方法,但也可能导致泌乳性能降低。因此,如何在提高反刍动物氮利用效率的同时兼顾其泌乳性能是一个亟待解决的难题。本研究在低蛋白日粮情况下分别补饲过瘤胃蛋氨酸(Rumen-protected methionine,RPMet)、过瘤胃赖氨酸(Rumen-protected lysine,RPLys),以期探明其对泌乳后期奶山羊泌乳性能及氮利用效率的影响。试验从产奶量、乳成分、泌乳相关基因表达、瘤胃液指标、表观消化率、氨基酸(Amino acid,AA)利用以及血液生理生化指标等角度分别探讨了蛋氨酸、赖氨酸对泌乳后期奶山羊的生产性能及氮利用效率的影响及其机制,研究将为RPMet、RPLys在奶山羊生产上的应用提供理论依据。试验一低蛋白日粮补饲蛋氨酸对奶山羊生产性能的影响试验共选取30头泌乳天数相近、状态良好的奶山羊。根据其胎次、产奶量、体重,完全随机区组分为以下3组进行试验:对照组,饲喂符合NRC标准代谢蛋白(Metabolicprotein,MP)的基础日粮(C组,n=10);缺乏组,饲喂MP为对照日粮88%水平的缺乏日粮(D组,n=10);过瘤胃蛋氨酸组,在缺乏日粮基础上每头奶山羊每天补饲1 g过瘤胃蛋氨酸(DM组,n=10)。试验周期为7周,前2周为适应期,后5周为正试期。正试期间,粪样于第一、三周采集,瘤胃液及血液于第二、四周采集。采食量于第一、三周各测定一次,每次连续测定两天。产奶量于每周最后两天测定,同时收集乳样用于乳成分分析。正试第五周,每组随机选取4只奶山羊进行活体采样,采集其右侧乳腺用于后续泌乳相关基因及AA转运载体mmRNA丰度测定。结果发现,各处理组间的干物质采食量(Dry matter intake,DMI)均无显著差异,但DM组的乳产量、能量矫正乳、4%脂肪矫正乳产量均显著高于D组(P<0.05)。DM组的乳蛋白产量、乳糖产量以及乳糖含量也显著高于D组(P<0.05)。DM组乳蛋白合成相关基因CSN1S1、CSN2、CSN3、LTF及乳脂分泌相关基因BTN1A1、XDH、ADFR的mRNA丰度较C组均显著上调(P<0.05)。同时,DM组的饲料转化率、氮转化率显著高于C组(P<0.05)。DM组乳中水解的蛋氨酸、脯氨酸浓度较C组均显著提高(P=0.04,P=0.001)。此外,DM 组 AA 转运载体SLC1A1、SLC1A4、SLC43A1的mRNA丰度较C组也显著上调(P<0.05)。总之,低蛋白日粮基础上补饲RPMet不仅提高了奶山羊的日粮氮利用水平,增强了乳腺AA转运载体mRNA丰度,而且显著提升了乳腺泌乳相关基因mRNA丰度。以上结果提示,蛋氨酸可能通过提高机体AA利用效率、上调泌乳相关基因表达水平提升了奶山羊泌乳性能。试验二低蛋白日粮补饲赖氨酸对奶山羊生产性能的影响试验同样选取了 30头泌乳天数相近、状态良好的奶山羊,根据其胎次、产奶量、体重,完全随机区组分为以下3组进行试验:对照组,饲喂符合NRC标准MP的基础日粮(C组,n=10);缺乏组,饲喂MP为对照日粮88%水平的缺乏日粮(D组,n=10);过瘤胃赖氨酸组,在缺乏日粮基础上每头奶山羊每天补饲6g过瘤胃赖氨酸(DL组,n=10)。试验期安排、采样时间及方法与试验一相同。结果发现,各处理组间的DMI均无显著差异。但DL组的乳蛋白含量显著高于D组和C组(P<0.05),乳中尿素氮水平较C组有下降趋势(P=0.11),血中尿素氮水平显著下降(P<0.05)。同时,低蛋白日粮补饲赖氨酸显著提高了乳蛋白分泌相关基因CSN1S1、CSN2的mRNA丰度(P<0.05)。此外,DL组乳中水解支链AA浓度及半胱氨酸浓度较对照组均显著提高(P<0.05),DL组的AA转运载体SLC1A1、SLC1A4、SLC43A1的mRNA丰度较对照组也显著上调(P<0.05)。以上结果提示,在低蛋白日粮基础上补饲RPLys提高了机体氮利用效率、乳腺AA转运载体mRNA表达丰度,最终使乳中水解支链氨基酸浓度升高,乳蛋白含量上升。综上,低蛋白日粮情况下补饲RPMet、RPLys均对奶山羊的生产性能有影响,但其作用机制有所不同。蛋氨酸可能通过提高机体氮代谢使AA利用效率提高,上调乳腺AA转运载体及泌乳相关基因表达,最终使奶山羊泌乳性能提升。赖氨酸可能通过提高机体AA平衡,上调乳腺AA转运载体mRNA表达丰度,最终使奶山羊乳蛋白含量上升。本研究系统地评价了 RPMet、RPLys在低蛋白日粮中发挥的作用,不仅为RPMet、RPLys在奶山羊生产上的应用提供了理论依据,也为蛋氨酸、赖氨酸影响乳合成的差异机制研究提供了参考。