【摘 要】
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目的氧化钕是一类新型的稀土氧化物材料,被广泛应用于多个领域。随着纳米技术的发展与应用,暴露于纳米氧化钕的职业人群也越来越多,其对健康潜在的威胁也受到了人们的关注。目前关于纳米氧化钕的研究较为匮乏,且其毒性机制也并未完全被阐释。基于这样的背景,本研究重点探讨了纳米氧化钕对早期发育的影响,并通过多种生物学手段揭示其可能的毒性机制,希望为职业卫生暴露者提供可靠的实践指导。方法本研究使用不同浓度纳米氧化钕
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目的氧化钕是一类新型的稀土氧化物材料,被广泛应用于多个领域。随着纳米技术的发展与应用,暴露于纳米氧化钕的职业人群也越来越多,其对健康潜在的威胁也受到了人们的关注。目前关于纳米氧化钕的研究较为匮乏,且其毒性机制也并未完全被阐释。基于这样的背景,本研究重点探讨了纳米氧化钕对早期发育的影响,并通过多种生物学手段揭示其可能的毒性机制,希望为职业卫生暴露者提供可靠的实践指导。方法本研究使用不同浓度纳米氧化钕颗粒（0,50,100,200,400和800μg/m L）连续处理斑马鱼胚胎5天,随后通过形态学观察记录其死亡率、畸形率以及心率变化情况,通过原位杂交方法进一步检测与心脏发育相关的基因Cmlc2的表达。同时收集胚胎提取蛋白及RNA,通过Western blot及Real-time PCR技术检测自噬及凋亡相关蛋白和基因的表达情况。使用激光共聚焦显微镜观察斑马鱼胚胎脑血管的变化情况,进一步通过TUNEL染色及显微注射m Cherry-LC3 m RNA于Tg（Flk-1:EGFP）转基因斑马鱼胚胎,探究自噬及凋亡在纳米氧化钕颗粒影响脑血管发育中的作用。结果（1）纳米氧化钕颗粒能够进入到斑马鱼胚胎消化道。（2）形态学观察统计:斑马鱼胚胎死亡率、畸形率及畸形程度呈浓度依赖性,即随浓度增加而升高。（3）纳米氧化钕能够影响斑马鱼胚胎心率,导致胚胎心率下降及严重的心率不齐,且原位杂交结果显示:纳米氧化钕暴露组Cmlc2 m RNA表达增加。（4）纳米氧化钕能够干扰斑马鱼胚胎脑血管发育,导致脑血管消失及脑血管排列的紊乱,TUNEL染色及显微注射结果显示:纳米氧化钕暴露组胚胎脑血管的消失可能与自噬的下调及神经元的凋亡相关。（5）分子水平的检测显示:自噬相关蛋白LC3表达无明显变化,而凋亡相关蛋白（cleaved-caspase3、Bax、P53）上调。结论纳米氧化钕能够干扰斑马鱼胚胎早期发育,其毒性机制可能与凋亡的激活相关。
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