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目的：Wnt信号通路在多巴胺能神经元的发育及帕金森病多巴胺能神经元的损伤中发挥着重要作用。本研究旨在观察经典Wnt信号通路的相关蛋白及其抑制剂Dkk1是否在MPP+诱导的PC12细胞中发生改变,并初步探讨其可能机制。方法：用不同浓度的MPP+作用于PC12细胞,MTT法检测在不同时间细胞的存活率及Western Blot检测不同时间点Dkk、β-catenin和p-Ser9-GSK-3β表达的变化情况。LiCl预处理1h后,再用MPP+作用PC12细胞,同时也检测细胞的存活率及凋亡的情况,检测不同时间点Dkk1. β-cateninn和p-Ser9-GSK-3p表达的变化情况。结果：①不同浓度的MPP+对PC12细胞作用24h,细胞存活率没有显著变化,高浓度的MPP+对PC12细胞作用48h和72h后细胞存活率有显著变化,并且在1000μMMPP+作用72h后,细胞存活率降至最低45.0%,而1000μMMPP+作用48h和72h对细胞存活率的影响并没有显著性差异。②Western Blot结果显示,在6-24h,MPP+诱导Dkk1的表达显著增加,其表达高峰时间先于细胞的死亡时间,但是Dkk1的水平在48h恢复至正常。MPP+作用8h后,β-catenin的水平开始有降低的趋势,在24h至48h其水平则显著降低,p-Ser9-GSK-3β(GSK-3β的非活化形式)在MPP+作用6-48h减少。③LiCl预处理可显著增加PC12细胞中β-catenin和p-Ser9-GSK-3β的表达。④LiCl预处理减轻MPP+诱导的PC12细胞存活率的减少,Annexin Ⅴ-FITC/PI流式细胞术及TUNEL法显示MPP+诱导的PC12细胞凋亡率的增加也可被LiCl(1mM)减少。结论：经典Wnt信号通路蛋白和其抑制剂Dkk1可能参与了MPP+诱导的PC12细胞的减少,Dkk1可能通过抑制经典Wnt信号通路蛋白发挥作用。目的：第一部分实验表明Dkk1在MPP+致PC12细胞损伤模型中的诱导表达先于细胞死亡,本实验旨在探讨Dkk1在MPP+致PC12细胞损伤模型中的机制。方法：通过对外源性的给予·rhDkkl联合MPP+处理PC12细胞48h后,检测细胞存活率及Wnt信号通路相关蛋白表达的变化情况。通过siRNA技术下调Dkkl在PC12细胞的表达,观察细胞凋亡情况及Wnt信号通路相关蛋白表达的变化情况。结果：①hDkk1(100ng/ml)与MPP+联合作用细胞48h后检测细胞存活率,结果显示：rhDkkl加重MPP+对PC12细胞的损伤作用,而LiCl预处理1h并不能显著改善两者联合应用引起的细胞损伤作用。②hDkk1促进MPP+诱导的PC12细胞中TH的减少。与MPP+单独处理组相比,两者联合应用β-catenin减少的更多,但p-Ser9-GSK-33β轻微减少。③Dkk1-siRNA可以显著减轻MPP+诱导的PC12细胞的凋亡。④Dkk1-siRNA有效的增加β-catenin和p-Ser9-GSK-3β的表达,同时也显著提高TH的水平。结论：Dkkl参与了MPP+诱导的PC12细胞的凋亡,其机制可能与抑制经典Wnt信号通路相关。目的：本实验旨在观察Dkkl在6-OHDA损伤大鼠的帕金森病模型中的作用。方法：通过脑立体定位仪经MFB给予6-OHDA损伤大鼠,制备帕金森病模型。另有LiCl预处理7d后再给予6-OHDA损伤大鼠组,及通过黑质给予rhDkk1与MFB给予6-OHDA联合损伤大鼠组。术后35d多聚甲醛灌注免疫组化检测各组黑质多巴胺能神经元的损伤情况,并取大鼠腹侧中脑Western Blot检测TH、Dkk1及β-catenin、 p-Ser9-GSK-3β的变化情况。结果：①6-OHDA损伤组TH阳性的神经元数量明显减少,LiC1预处理组的TH阳性的神经元数量则明显增加；rhDkk1与6-OHDA联合损伤组,与6-OHDA单独损伤组相比,TH阳性的神经元数量则降低的更明显。②Dkk1在6-OHDA损伤的大鼠术后35d腹侧中脑的表达明显增加。③经典Wnt信号通路的抑制在6-OHDA损伤的大鼠腹侧中脑中也被检测到,包括β-catenin和p-Ser9-GSK-3β的降低,而两者表达水平均可被LiCl升高；rhDkkl与6-OHDA联合应用可进一步加剧β-catenin和p-Ser9-GSK-3β的减少。结论：Dkkl在6-OHDA损伤大鼠的腹侧中脑被诱导表达,其可能通过抑制经典Wnt信号通路而促进6-OHDA损伤大鼠黑质多巴胺能神经元的损伤。