鞣花酸抗鼻咽癌CNE-2细胞的作用及分子机制初探

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目的:研究五倍子提取物鞣花酸对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响,探讨鞣花酸抗鼻咽癌的生物学作用及其可能的机制。方法:培养鼻咽癌CNE-2细胞24h后,设为4组实验组,3组药物组分别加入(2、4、6mg/1)的鞣花酸干预,对照组(即0mg/1)不干预。1.鞣花酸干预48h后,显微镜下与对照组比较观察鞣花酸对鼻咽癌CNE-2细胞的形态的变化。2.鞣花酸干预48h后,Hoechst33258法染色,与对照组比较观察鞣花酸对鼻咽癌CNE-2细胞凋亡的作用。3.分别于鞣花酸干预24h、48h、72h后,MTT实验分析,与对照组相比鞣花酸对鼻咽癌CNE-2细胞增殖的影响。4.鞣花酸干预48h后,流式细胞仪分析,与对照组比较鞣花酸对鼻咽癌CNE-2细胞凋亡率的影响。5.鞣花酸干预48h后,Western-blot检测,与对照组相比鞣花酸对鼻咽癌CNE-2细胞中COX-2、 NF-κB的表达的影响。结果:1.浓度为(0、2、4、6mg/1)的鞣花酸干预鼻咽癌CNE-2细胞后,随药物浓度的增大,漂浮的死亡细胞数量随之增加。鼻咽癌CNE-2活细胞数量随药物浓度的增大而明显减少。2. Hoechst33258染色后,随药物浓度的增大,鼻咽癌CNE-2染色细胞减少,而细胞核浓缩、核破裂的数量随药物浓度的增大而增多。3.MTT法检测,随药物浓度的增加,鼻咽癌CNE-2细胞明显的生长抑制现象随之增加,呈浓度依赖性。3.流式细胞术结果显示:鞣花酸处理鼻咽癌CNE-2细胞48h后,药物组(2、4、6mg/l)凋亡率分别为:(19.17%±0.91%、38.44%±3.13%、61.74%±4.28%),与对照组(0.21%±0.08%)相比,药物组凋亡现象明显(P<0.05),药物组之间两两比较差异明显,药物浓度越高,凋亡越明显(P<0.05)。3. Western-blot检测结果:各药物组COX-2、NF-κB与对照组的比较均表达降低,浓度越高,表达越低。结论:鞣花酸能抑制鼻咽癌CNE-2细胞的增殖,诱导其凋亡;其机制可能与抑制COX-2和NF-κB的表达有关。
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