【摘 要】
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背景:乳酸菌在食品加工与保鲜、医疗保健、动物饲养等方面具有非常大的应用潜力和前景。然而,我国的大部分食品发酵行业的菌种依旧依赖于国外的进口菌种,新疆传统发酵乳品中蕴含丰富的土著性优势菌种资源,目前很少得到开发和应用。方法:15份来自塔城地区哈萨克族的酸马奶、酸驼奶样品经过稀释后利用五种不同的培养基涂平板进行分离,按照乳酸菌的菌落、细胞形态、接触酶阴性及革兰氏染色阳性的特征进行初步筛选;通过种、属水
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背景:乳酸菌在食品加工与保鲜、医疗保健、动物饲养等方面具有非常大的应用潜力和前景。然而,我国的大部分食品发酵行业的菌种依旧依赖于国外的进口菌种,新疆传统发酵乳品中蕴含丰富的土著性优势菌种资源,目前很少得到开发和应用。方法:15份来自塔城地区哈萨克族的酸马奶、酸驼奶样品经过稀释后利用五种不同的培养基涂平板进行分离,按照乳酸菌的菌落、细胞形态、接触酶阴性及革兰氏染色阳性的特征进行初步筛选;通过种、属水平的特异性引物PCR扩增,结合生理生化及16S rRNA基因扩增、测序进行鉴定,并通过Rep-PCR进行乳酸菌的遗传差异分析;在此基础上,对乳酸菌代表菌株利用11种糖的能力进行定性分析,同时采用K-B纸片分析菌株的耐药谱。结果与结论:1.从15份酸马奶、酸驼奶样品中总共分离得到683株纯培养物,311株纯培养物来自7份酸马奶,372株分离自8份酸驼奶。其中583株接触酶实验呈阴性,502株革兰氏染色呈阳性。2.通过种、属水平特异性引物PCR扩增,502株疑似乳酸菌中优势菌种为肠球菌属和乳杆菌属,分别为208株和172株。结合Rep-PCR及16S rRNA基因测序可知,502株疑似乳酸菌包括Lactobacillus、Enterococcus、Lactococcus、Leuconostoc、Streptococcus五个乳酸菌属和一个非乳酸菌属(Bacillus)。其中乳杆菌属由Lb.plantarum、Lb.fermentum、Lb.acidophilus、Lb.casei、Lb.paracasei五个种构成。肠球菌属包括E.durans、E.faecalis、E.faecium、E.hirae四个种。乳球菌属仅分离得到一株,为Lc.garvieae。3.代表菌株中84%的菌株耐受3-7种抗生素,3株抗生素耐受2种抗生素,1株仅耐受一种抗生素;25株菌株均对利福平敏感,2株代表菌株耐受红霉素,76%的菌株对庆大霉素耐药。所有的代表菌株能利用葡萄糖、乳糖、果糖,只有1株菌株能利用10种碳源,12%的菌株可以利用9种碳源。
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