基于聚集诱导发光的荧光聚合物纳米粒子制备及生物应用

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利用乙烯基改性的具有聚集诱导发光(AIE)特性的分子TPE-VBC、苯乙烯和马来酸酐之间的共聚反应,开发了一种基于AIE性质的荧光自报告方法,通过自稳定沉淀聚合制备荧光聚合物纳米粒子(PFPs),并且能够实时、灵敏地监测荧光聚合物纳米粒子的形成,有助于对沉淀聚合机理进行全面了解。在确定聚合体系的基础上,研究了聚合温度、单体浓度、聚合时间、荧光分子、交联剂等反应条件对所制备聚合物纳米粒子的聚合过程中粒径大小、粒径分布、荧光强度及反应体系的影响。此外,利用PFPs的表面反应,尺寸均匀可调的PFPs可以应用于生物标记和光控免疫治疗。具体研究内容如下:在合成了具有AIE性质的荧光分子后,以0.025:0.95:1的单体摩尔比例加入荧光分子TPE-VBC,苯乙烯和马来酸酐进行沉淀聚合,溶剂选用乙酸异戊酯,在60℃的氮气氛围下加入偶氮二异丁腈(AIBN)引发剂后,制备PFPs。当反应时间从5min延长到90min时,粒子的粒径从95nm逐渐增长到309nm,而粒子的多分散系数(PDI)都小于0.15。因此,可以方便地制备出粒径分布较窄的理想尺寸荧光纳米颗粒。通过荧光自报告的方法发现了在生长过程中的三个发展阶段以及其中的“动态硬化”行为。两个明显的转折点将聚合物纳米粒子的生长过程分为了三个阶段。在聚合过程中的阶段一,荧光强度的增加很慢。在聚合过程中的阶段二,荧光强度的增加很迅速,并伴随有发射峰从617nm到603nm的蓝移,这表明了在聚合物粒子生长过程中的“动态硬化”现象。在阶段二之后TPE-VBC分子的单体浓度急剧下降,导致在阶段三时聚合体系的荧光强度增加又变得缓慢。此外,利用PFPs的表面反应,可以利用尺寸均匀可调的PFPs进行生物标记和光控免疫治疗。荧光纳米颗粒包覆的NK细胞对癌细胞的免疫治疗效果显著。荧光纳米粒子在光照下可以生成活性氧(ROS),当聚合物纳米粒子的浓度超过7.5μg/L时这样的ROS的产生对NK细胞产生了显著的光动力学效果,而低浓度的荧光纳米粒子在黑暗和光照下对NK细胞均无伤害。PFPs以其良好的生物标记和ROS产生能力,在生物医学领域具有巨大的应用潜力。
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