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目的:慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是呼吸系统常见病和多发病,在全世界范围内发病率和死亡率呈不断升高趋势,诊疗任务艰巨。以发病机制为主的疾病异质性研究和表型识别在个体化诊疗中有重要意义。炎症过程是目前公认的主要致病机制,不论在局部还是全身炎症过程中,炎症因子均参与并发挥重要作用。白细胞介素-32(interleukin-32)是新发现的促炎细胞因子,参与了COPD发生发展,其高表达与COPD关系密切;超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,Hs-CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)是目前临床常用的反应全身炎症状况的生物标志物,多用于评估病情及指导治疗。本实验以COPD患者为研究对象,分别进行病程时期(急性加重期、缓解期)、评估分级(A、B、C、D组)及CT分型(气管炎型、肺气肿型、混合型)的分组,通过IL-32、Hs-CRP和PCT表达水平的检测和相关性分析,为疾病异质性研究和个体化治疗提供新思路。方法:1研究对象2014.1-2015.1河北医科大学第二医院门诊就诊的COPD患者和同期门诊体检证实的健康对照者。入选标准:COPD患者的诊断符合2013年中华医学会呼吸分会慢性阻塞性肺疾病学组修订的《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》,其中男性50例,女性20例,平均年龄65.11±9.54岁;健康对照组男性5例,女性7例,平均年龄69.00±3.19岁。受试者年龄、性别差异无统计学意义(P>0.05)。排除标准:①肺炎;②合并其他部位细菌感染;③合并支气管哮喘、支气管扩张、严重气胸、肺结核活动期,合并严重心脑血管、肾脏及血液系统、免疫系统疾病者;④外院接受抗感染治疗超过5天。患者就诊时行肺HRCT检查和Hs-CRP测定,留取血液样本,病情允许者行肺功能检查;未行肺功能检查者病情好转后完善肺功能检查。依据Anthonisen提出的COPD急性加重期和缓解期标准将研究对象分为①COPD急性加重期,男性29例,女性13例,平均年龄67.36±9.62岁;②COPD缓解期,男性21例,女性7例,平均年龄61.75±8.50岁。并依据中华医学会呼吸分会2013年制定的《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》综合评估标准将COPD患者分为①A组:低风险,症状少;男性11例,女性4例,平均年龄63.53±6.44岁;②B组:低风险,症状多;男性9例,女性5例,平均年龄65.14±8.89岁;③C组:高风险,症状少;男性10例,女性4例,平均年龄56.64±7.92岁;④D组:高风险,症状多;男性20例,女性7例,平均年龄70.37±8.92岁。同时根据HRCT将患者分为①肺气肿型;男性20例,女性2例,平均年龄64.91±9.31岁;②气管炎型;男性14例,女性12例,平均年龄65.85±11.94岁;③混合型:男性16例,女性6例,平均年龄64.45±7.69岁。2014.1—2015.1河北省人民医院胸外科行手术治疗的肺癌患者,男性16例,女性2例,平均年龄60.09±12.71岁,均行肺CT、肺功能、血气分析及血常规检查。将患者分为①健康吸烟组:肺功能正常,有吸烟史,男性6例,女性0例,平均年龄52.67±9.50岁;②健康非吸烟组:肺功能正常,无吸烟史,男性4例,女性2例,平均年龄69.25±8.96岁;③COPD吸烟组:符合COPD诊断标准,FEV1%FVC<70%,男性6例,女性0例,平均年龄56.50±14.6岁。2标本采集门诊就诊的COPD患者及同期健康体检者就诊时空腹采肘静脉血4ml,注入干燥的真空非抗凝管中,以普通离心机4000r/min离心5分钟,吸取上清液置于EP管中,标记,-70℃冰箱冻存,待ELISA法检测IL-32、PCT表达水平。门诊就诊患者采肘静脉血2ml,注入EDTA抗凝管中,即刻免疫层析法检测全血Hs-CRP表达水平。患者手术中,取手术切取肺组织标本癌旁2cm外肺组织,分组并做好标记,将肺组织匀浆后取上清液,同时留取患者血清,方法同上,于-70℃冻存,待ELISA法检测IL-32表达水平。3血清、肺组织IL-32,血清PCT和全血Hs-CRP表达水平的测定ELISA法分别测定血清和肺组织上清液中IL-32和血清PCT浓度。免疫层析法检测全血Hs-CRP表达水平。最小的IL-32检测浓度小于15pg/ml。Hs-CRP正常参考值为<5mg/L,>5mg/L为异常;PCT正常参考值为<0.05ng/ml,>0.05ng/ml为异常,0.05-0.5ng/ml为局部感染,0.5-2ng/ml严重细菌感染或脓毒症发生率增高。结果:1 COPD患者血清和肺组织上清液IL-32表达水平高于健康对照组(包括健康吸烟组和健康非吸烟组)(P<0.05);健康吸烟组肺组织上清液和血清中IL-32表达水平高于健康非吸烟组(P<0.05);COPD患者和健康吸烟组肺组织上清液中IL-32表达水平高于血清(P<0.05)。2 COPD患者急性加重期与缓解期血清IL-32表达水平高于健康对照组(P<0.05);COPD急性加重期血清IL-32表达水平高于缓解期(P<0.05)。3 A、B、C、D组血清IL-32表达水平高于健康对照组(P<0.05);D组血清IL-32表达水平高于A、B和C组(P<0.05);余差异无统计学意义(P>0.05)。4肺气肿型和混合型IL-32表达水平高于气管炎型(P<0.05);肺气肿型和混合型之间差异无统计学意义(P>0.05)。5 COPD患者急性加重期血清Hs-CRP、PCT表达水平均高于缓解期和健康对照组(P<0.05);COPD缓解期与健康对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。6 A、B、C、D组Hs-CRP表达水平高于健康对照组(P<0.05),D组Hs-CRP表达水平高于A组、B组和C组(P<0.05),余组间差异无统计学意义(P>0.05);D组PCT表达水平高于B组和健康对照组(P<0.05),余组间差异无统计学差异(P>0.05)。7混合型、气管炎型和肺气肿型Hs-CRP表达水平高于健康对照组,混合型Hs-CRP表达水平高于气管炎型和肺气肿型,气管炎Hs-CRP表达水平高于肺气肿型(P<0.05);气管炎型、混合型PCT表达水平高于肺气肿型和健康对照组(P<0.05),气管炎型和混合型间PCT表达水平差异无统计学意义(P>0.05),肺气肿型和健康对照组间PCT表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。8 COPD患者血清IL-32表达水平与FEV1%pre存在负相关(r=-0.414,P<0.05);COPD患者血清IL-32表达水平与RV%TLC存在正相关(r=0.311,P<0.05);COPD患者血清IL-32与Hs-CRP、PCT无相关性(P>0.05);COPD患者血清Hs-CRP、PCT与气流受限无相关性(P>0.05)。结论:IL-32参与了COPD的发生发展,与气流受限和肺气肿程度正相关;促炎细胞因子的上调和高表达与COPD关系密切。IL-32及其信号通路可能是COPD疾病异质性和个体化诊治的潜在靶点。Hs-CRP、PCT作为非特异性炎症指标,可一定程度上提示COPD急性加重,指导急性加重期的抗生素治疗;但其表达水平与气流受限无相关性,灵敏性和特异度均不足以体现疾病异质性及指导个体化治疗。