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和厚朴酚（honokiol）是木兰科植物厚朴（Magnolia officinalis Rehd. et Wils.）或凹叶厚朴（Magnolia officinalis Rehd. et Wils. var. biloba Rehd. et Wils.）的主要活性成分之一，具有中度抗肿瘤活性，对多种肿瘤细胞的增殖均有抑制作用，但存在口服生物利用度不高、体内维持时间短等缺点。为改善和厚朴酚的药代动力学性质，本实验室对和厚朴酚进行了结构修饰得到了一系列衍生物，前期药理活性筛选结果表明，衍生物HK-13与和厚朴酚相比，抗肿瘤作用明显增强。为了解HK-13的药动学性质，本文对HK-13化合物进行了早期药代动力学研究，主要包括体内代谢动力学（生物利用度、组织分布）和血浆蛋白结合率研究。 1. HK-13的体内药动学研究 本文采用超快速液相色谱串联三重四级杆质谱（UFLC-MS/MS）仪建立了大鼠血浆和小鼠组织中 HK-13的含量测定方法，并进行了方法学验证。样品前处理采用甲醇沉淀蛋白，离心后取上清液；选用 SAHA作为内标物质。色谱条件为： Waters Acquity UPLCTM BEH C18色谱柱（2.1×100 mm，1.7μm），流动相为0.1%甲酸水-甲醇，梯度洗脱。采用电喷雾离子源（ESI），正离子多反应监测（MRM）模式，HK-13和内标SAHA定量离子对分别为m/z379.3→279.2、m/z265.2→232.2。HK-13在大鼠血浆和小鼠组织中线性范围均为0.98~1000 ng/mL，相关系数 r＞0.99；准确度分别为93.07%~114.42%、86.56%~113.92%，日内精密度和日间精密度 RSD均＜10.14%；回收率分别为67.31%~81.16%、64.28%~84.52%，RSD＜7.46%；基质效应分别为85.95%~99.02%、86.47%~99.36%， RSD＜5.50%。该分析方法专属性强，线性关系良好、准确度高、精密度好、稳定性好，符合生物样品测试要求。 采用建立的方法测定大鼠血浆和小鼠心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、骨骼肌、脑组织中HK-13的含量，研究HK-13的生物利用度和组织分布规律，结果如下： 采用DAS2.0软件对大鼠血浆中HK-13的浓度进行拟合，求算药代动力学参数，大鼠灌胃给药（10 mg/kg）后， Cmax为151.048±11.159μg/L，半衰期t1/2为10.546±1.956 h，药时曲线下面积AUC(0-t)和AUC(0-∞)分别为2185.858±399.71μg/L*h、3035.306±721.17μg/L*h，表观分布容积V为50.547±4.307 L/kg；静脉给药（5 mg/kg）后，Cmax为967.231±275.81μg/L，半衰期t1/2为13.778±1.803 h，药时曲线下面积 AUC(0-t)和 AUC(0-∞)分别为2162.186±583.9μg/L*h、2828.329±602.87μg/L*h，表观分布容积V为35.662±12.778 L/kg；HK-13在大鼠体内的口服绝对生物利用度为50.55%。表明HK-13经灌胃给药后在大鼠体内具有良好的吸收效果，表观分布容积V约为35 L/kg，表明HK-13能在体内得到广泛分布。 Babl/c小鼠静脉给药（20 mg/kg）后，HK-13在小鼠组织内的分布量为肺﹥脾﹥肾﹥心﹥肠﹥胃﹥肝﹥骨骼肌﹥脑，除脑组织外，HK-13在各组织中均有较高的含量，肺组织中药物一直维持在相对较高的浓度，约为15μg/g。表明HK-13在小鼠体内具有较强的穿透能力，能广泛分布到各组织，其中对肺组织具有一定的靶向性且作用维持时间长。 2. HK-13的血浆蛋白结合率研究 本部分建立了透析外液中 HK-13的含量检测方法，方法学考察结果显示线性范围为0.98~125 ng/mL，r=0.999；准确度为86.97%~112.93%；日内和日间精密度RSD＜6.61；回收率为60.42%~88.49%；基质抑制率＜9.25%，RSD＜5.13；说明该方法满足生物样品测试要求，可以用于血浆蛋白结合率研究中 HK-13在透析外液中的含量测定。 本研究采用平衡透析法研究HK-13的血浆蛋白结合率，平衡时间为24 h，低、中、高浓度（25、50、100 ng/mL）HK-13的大鼠血浆蛋白结合率分别为97.02±0.29%、96.99±0.12%、86.15±1.87%，人体血浆蛋白结合率分别为96.18±0.27%、89.15±0.36%、76.75±2.56%。结果表明HK-13的血浆蛋白结合率较高且具有浓度依赖性，与其它血浆蛋白结合率较高的药物联合使用时，可能发生蛋白竞争性结合从而产生毒性。 本实验对HK-13的体内药代动力学性质进行了初步研究，测定了HK-13在大鼠体内的生物利用度和小鼠组织分布，通过阐述其药动学特征，为HK-13的成药性和进一步的药物作用机制、安全性研究等提供理论依据。此外，通过血浆蛋白结合率研究，为今后药理药效实验中药物的联合应用提供了重要依据。