石榴皮抗腹泻有效部位的筛选及安石榴苷提取工艺的优化

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石榴皮为石榴科石榴属落叶灌木或小乔木石榴(Punica granatum L.)的干燥果皮,其性温、味酸涩、归大肠经,具有涩肠止泻、驱虫止血以及治疗痢疾、便血、崩漏和带下疾病的功效。然而,到目前为止国内外尚未有关于石榴皮提取物的抗腹泻有效部位和有效部位的化学成分的相关报道。因此,本实验对石榴皮抗腹泻有效部位、有效部位的主要化学成分进行了研究,并对其中的成分安石榴苷的提取工艺进行优化。为石榴皮资源在抗腹泻研究方面的进一步开发提供一定的科学依据,为石榴皮在药物提取的工业化生产方面奠定基础。本实验首先对石榴皮抗腹泻作用进行了评估,又对石榴皮水提物的生物活性部位进行了筛选,采用极性不同的溶剂分级萃取获得三种部位,即乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水残余物部位,进行了三种部位的抗蓖麻油诱导的腹泻模型试验。结果显示,只有乙酸乙酯部位具有显著地抗腹泻作用(p<0.05)。此外,乙酸乙酯部位的口服剂量为100、200和400 mg/kg时,在小鼠的碳粉推进试验中产生了显著的抑制胃肠道蠕动作用(p<0.05)。在大鼠的小肠积液试验中,它还对抑制肠积液表现出了显著地作用和剂量相关性(p<0.05)。组织病理学分析表明,乙酸乙酯部位可以改善小鼠的小肠病变。采用HPLC/ESI-MS分析手段,对抗腹泻的有效部位乙酸乙酯部位进行了主要化学成分分析,结果显示,HHDP-葡萄糖、没食子酸、安石榴林、安石榴苷、柯里拉京和鞣花酸是抗腹泻部位的主要化学成分。在确定了有效部位的主要化学成分后,本试验对石榴皮中的安石榴苷进行了提取工艺的优化。以安石榴苷提取率为考察指标,在单因素试验基础上,采用田口试验分析法对乙醇浓度、提取温度、提取时间和液料比等提取条件进行了优化。结果表明,乙醇回流提取安石榴苷最佳工艺条件为:乙醇浓度10%、提取温度80℃、提取时间2 h、液料比40 mL/g、粒径大小0.09 mm、提取次数为2次,在此条件下安石榴苷提取率为(492.16±1.91)mg/g,与预测值相近。田口试验法优化得到的提取工艺稳定合理,准确可靠,是提取石榴皮中安石榴苷的可行方法。本研究首次对石榴皮的抗腹泻有效部位和有效部位的主要化学成分进行了研究,并且首次采用田口试验法对石榴皮中的安石榴苷进行了提取工艺优化,为石榴皮资源在抗腹泻研究方面的进一步开发提供一定的科学依据,为石榴皮在药物提取的工业化生产方面奠定基础。
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