背景和目的:结核病是机体接触感染结核分枝杆菌后在一定条件下引起的慢性感染性疾病。是青年较容易发生的一种慢性和缓发的传染病,潜伏期为4-8周,其中80%结核菌感染入侵肺部,称为肺结核。飞沫传播是肺结核最重要的传播途径,传染源主要是继发性感染肺结核的患者,除少数发病急促外,临床上多呈慢性发展过程,患者经常会出现低热、乏力等全身症状,呼吸系统包括咳嗽、咯血等症状。其他部位如脑膜、淋巴结、腹膜、皮肤、盆腔、肠道、骨骼等也可继发感染。随着生活环境的污染,人口日益增多和艾滋病的传播,结核病的发病率日趋增高。目前全球大概有30%的人口(约20亿)曾经接触并感染过结核分枝杆菌。我国每年约13万人死于结核病,有近半的人口曾感染过结核分枝杆菌。在2010年进行了第五次全国结核病流行病抽样调查报告,报告结果显示我国结核病感染率呈上升趋势,而且患者检出率较低,全国结核病患者中只有2/3属于活动性结核,其中结核分枝杆菌涂阳患者中有3/5的尚未被发现。因此,如何及时诊断结核病,包括活动性结核和潜伏期结核是控制结核病传播的重要手段之一。临床常用于诊断结核病的方法除了结合患者的临床症状和病史资料外,主要是通过影像学检查、病理学检查、实验室检查以及结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)实验等方法进行结核病的诊断。实验室检查方法诊断结核病的方法主要有微生物学检查方法、分子生物学检查以及免疫学检查。通常用于临床的微生物检查方法是结核菌涂片的抗酸染色以及结核菌培养。分子生物学检查主要是荧光定量检测结核分枝杆菌(TB)的核酸扩增。免疫学检查方法有结核特异性免疫细胞三种抗体检测以及结核分枝杆菌特异性T淋巴细胞(Tspot-TB)检测。本文通过比较抗酸染色、结核菌培养、TB-PCR、结明三项以及Tspot-TB五种临床常用实验室诊断结核病的方法,探讨Tspot-TB实验联合结明三项实验诊断菌阴结核病患者的临床意义。研究对象及分组选取自2015年11月至2016年7月期间在河南省胸科医院呼吸科住院的疑似结核病患者277例,其中男性患者150例,女性患者127例,年龄18-76岁,平均29±2岁。收集记录277例病人个人资料(包括年龄、性别、病程、过敏史、用药史等),检测病人抗酸染色、结核菌培养、TB-PCR,结明三项以及Tspot-TB。结合相关影像学检查以及临床随访,将277例病人分为3组,A组为结核排菌组97例,其中男性患者46例,女型患者51例,均有典型的临床症状,而且患者临床的确诊符合国际传染性肺结核诊断的标准,本组实验数据用来评估各项检测指标的灵敏度。B组为菌阴结核病组93例,其中男性患者49例,女性患者44例,患者排除其他非结核性肺部疾病,根据2001年由中华医学会结核分会制定颁发的《肺结核诊断与治疗指南》,符合菌阴结核病的诊断标准,根据患者用药史,减少抗结核治疗药物对实验结果的影响。本组通过比较相关实验用来评估联合实验的诊断意义。C组为非结核组87例。其中男55例,女32例,通过相关检查确诊并排除结核病的存在,其中大叶性肺炎31例,慢性阻塞性肺炎16例,小细胞肺癌23例,肺脓肿17例。本组实验数据用于评价本次研究中的五种实验单项检测的特异性。统计学处理:以SPSS17.0软件进行统计分析,数据以均数±标准差表示,两组间的样本均数用x2检验,设定α=0.05,P<0.05为差异有统计学意义。结果1、抗酸染色、结核菌培养、TB-PCR、结明三项及Tspot-TB检测五种实验方法相比,Tspot-TB实验的灵敏度最高。2、Tspot-TB联合结明三项试验,对菌阴结核病组的阳性检出率明显增高,与T-spot及结明三项单项实验相比均有明显的统计学意义。3、Tspot-TB联合结明三项试验对非结核组的阴性检出率与单项实验相无明显的统计学意义。4、Tspot-TB联合结明三项试验联合诊断指数190.9%,高于Tspot-TB以及结明三项单项诊断指数,其差异有统计学意义。结论对于菌阴的结核病诊断,结明三项和Tspot-TB联合实验可以提高检出率。