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水产养殖业在我国国民经济发展中占有重要地位,在病害防治方面,通常使用大量抗菌素,造成环境污染并易产生抗药性,对人类健康造成危害。用生物免疫活性因子作为饲料添加剂来提高水产养殖生物抗病害能力,不破坏养殖区水体的生态,不损害养殖生物的生理机能,材料廉价易得,生产成本低。 本研究取出生15(±2)日的山羊羔,分离其肠道淋巴集结(peyer’s patch,PP),包括回肠淋巴集结(Ileum peyer’s patch, IPP)和空肠淋巴集结(Jejunumpeyer’s patch, JPP),经反复冻融,离心收集得到PP粗提物,作为饲料添加剂,检测了其对淡水白鲳多项免疫指标的影响。通过对白鲳白细胞吞噬活性、血清抗菌活力、血清溶菌酶及血清溶血素活性的测定结果发现,添加PP粗提物的实验组白鲳,各项免疫指标较只喂基础饲料的对照组显著提高,其中实验组白细胞吞噬活性达到52.33%,而对照组仅为20.67%,实验组与对照组相比增长达153%;实验组血清抗菌活力达0.675,而对照组仅为0.331,实验组与对照组相比增长达104%;溶菌酶活性基本呈同样变化规律,实验组达到0.15,而对照组平均在0.12,实验组与对照组相比增加了25%。这些结果表明PP粗提物可提高白鲳非特异性免疫功能。在添加PP粗提物后,实验组血清溶血素达到8.67,而对照组平均在4.33,实验组相对于对照组增加了100%,表明PP粗提物可提高白鲳特异性免疫功能。PP粗提物对白鲳血清酚氧化酶(phenoloxidase, PO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性提高的效果不明显。从PP粗提物对鱼体生长影响的实验结果看,添加PP粗提物饲喂15天后,白鲳总体重增长率为23.69%,而对照组的总体重增长率仅为10.98%,实验组比对照组多增重11.3%;对照组饵料系数为6.43,实验组为2.99,实验组相对于对照组饵料系数降低了53.5%,表明PP粗提物呵促进白鲳生长。这可能是由于PP提取物提高了鱼体的免疫力,使健康状况改善,或粗提物有促生长因子而表现出促进生长的综合效果。 为进一步确认PP粗提物中的活性组分,本实验采用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-25凝胶层析的方法对其进行了初步的分离纯化,共得18种组分。以小鼠脾淋巴细胞体外细胞培养作为特异免疫反应的模型,分别将18种PP组分