SUMO化是一种重要的蛋白质翻译后修饰，它参与转录因子的活性、核质运输、信号转导、细胞周期、线粒体分裂、DNA损伤修复及基因组稳定等多种分子调节过程，目前SUMO化信号通路参与生殖调控的研究已越来越受到重视。本研究在本实验室已构建的青蟹EST数据库的基础上，通过生物信息学分析筛选出SUMO化信号通路相关基因片段，克隆这些基因的全长cDNA序列，利用实时荧光定量PCR技术研究了这些基因在拟穴青蟹不同组织及性腺不同发育阶段的表达模式，并进一步采用原位杂交及免疫组化的技术研究了部分基因在拟穴青蟹配子发生过程中的定位，获得结果如下：1）本研究克隆获得了SUMO化信号通路上的四个基因SpSUMO-1、Sp-Uba2、Sp-NSE2及Sp-SENP1的全长cDNA序列：SpSUMO-1的全长cDNA为732bp，其中开放阅读框282bp，编码93个氨基酸；Sp-Uba2cDNA全长为2519bp，其中开放阅读框1944bp，编码647个氨基酸；Sp-NSE2cDNA全长为1144bp，其中开放阅读框633bp，编码210个氨基酸；Sp-SENP1cDNA全长为2077bp，其中开放阅读框1455bp，编码484个氨基酸。2）实时荧光定量PCR结果显示SpSUMO-1、Sp-Uba2、Sp-NSE2及Sp-SENP1基因在卵巢中的表达均显著高于其它各组织；而在性腺发育过程中，这四个基因的表达水平随着卵巢发育的成熟而呈下降趋势，在增殖期它们的表达水平均最高且显著高于其它各期的表达水平（P<0.05）。在精巢的不同发育阶段，这四个基因的表达水平相对恒定且各时期之间的表达水平无显著差异。而且在卵巢发育早期（第I-III期）这四个基因的表达水平显著高于其在精巢各发育阶段的表达水平（P<0.05）。3）原位杂交结果显示SpSUMO-1、Sp-Uba2、Sp-NSE2及Sp-SENP1基因在卵子发生过程的表达模式类似，在增殖期至卵黄发生早期，这四个基因均泛表达于卵原细胞和卵母细胞的细胞质和细胞核中，在卵黄发生中期及晚期，这四个基因主要集中在细胞核中表达。在精子发生过程中，SpSUMO-1在整个精子发生过程中都有表达，在初级精母细胞、精细胞及精子细胞的细胞核的阳性信号较强。同时，在精子细胞的顶体管也能检测到阳性信号。4）免疫组化结果显示，在整个卵子发生过程中，SpSUMO-1主要定位于所有卵原细胞及卵母细胞的细胞质中；在精子发生过程中，SpSUMO-1在精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞及精细胞中均能检测到阳性信号，但是在精子细胞中，其阳性信号只在细胞核中检测到。