脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus, EMCV)可以引起以仔猪急性脑炎、心肌炎及母猪繁殖障碍为特征的传染性疾病。EMCV可以感染小鼠,导致心肌炎、脑炎、糖尿病等。本研究通过将猪源EMCV GXLC株感染小鼠和断乳仔猪,来分析该病毒的致病性。根据发表在GenBank EMCV保守序列3D基因、小鼠和猪促炎细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6、iNOS及管家基因β-actin,分别设计特异性引物和探针,构建含有各自目的基因序列的重组质粒作为阳性标准品,建立相应的TaqMan real-time PCR检测方法。用标准品所构建的标准曲线相关系数(R2)达到0.998以上；可以检测到标准品下限浓度为1×101 copies/μL;与FMDV、CSFV、PRRSV、PRV、PCV2和BHK-21细胞所获得的DNA或cDNA为模板无交叉反应。检测促炎细胞因子和管家基因时,只有每种因子的质粒标准品和反转录获得的cDNA呈现阳性反应；组内与组间试验的变异系数均在2%以下。上述试验结果证明,我们建立的TaqMan real-time PCR方法灵敏度高,特异性强,重复性好,可用于EMCV、小鼠及猪的细胞因子的检测和定量分析。为研究猪源EMCV GXLC株对小鼠和仔猪的致病性,将其接种4周龄健康BALB/c小鼠和断乳仔猪。观察临床症状,观察大体病理变化及组织病理变化,检测心、脑、脾组织病毒含量,检测心、脑、脾组织中细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6、iNOS mRNA水平,并测定小鼠心脏／体重比值和血清中IL-1β、TNF-α蛋白含量,同时检测猪血清抗体滴度。结果表明：(1)感染小鼠表现出明显的神经症状,多数小鼠在出现症状后24 h内死亡；仔猪感染后,体温升高,表现出明显精神萎靡等症状。(2)剖检小鼠发现心脏有明显的白色坏死灶,脑出血；仔猪发现心脏膨大、心肌变软,脑充血,淋巴结肿大、充血。(3)感染小鼠的心重/体重比值显著升高,血清中IL-1β、TNF-α蛋白含量升高；猪血清中可检测到高滴度的抗EMCV抗体。(4)感染小鼠和仔猪脑、心、脾、血清中检测到大量病毒,并且其含量与临床症状、病理损害等密切相关。(5)小鼠和仔猪组织病理学观察发现,脑组织神经细胞变性、坏死,大脑皮层微血管有出血和炎性细胞浸润,心脏组织大面积心肌细胞坏死、组织降解、萎缩和弥漫性炎症；组织病理变化的评分值显著升高。(6)感染小鼠和仔猪的心、脑、脾组织中IL-1β、TNF-α、IL-6、iNOS mRNA表达水平显著上调,而且细胞因子表达的高峰期与出现典型临床症状、病理变化时期相一致。总而言之,猪源EMCV GXLC株对小鼠和仔猪明显致病性,而IL-1p、TNF-α、IL-6、iNOS等细胞因子在EMCV对小鼠的致病过程中发挥重要作用。