目的:可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体（Soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptors,SNARE）与帕金森病（Parkinson’s disease,PD）密切相关,本课题探究SNARE蛋白家族成员Ykt6与帕金森病的相关性,以及SNARE蛋白Ykt6在帕金森病模型中对自噬-溶酶体通路的作用。方法:（1）以SH-SY5Y细胞为研究对象,分别使用不同浓度的1-甲基-4-苯基-吡啶离子（MPP+）、鱼藤酮处理细胞48 h,MTT法检测细胞活力,建立帕金森病细胞模型。通过Western blot法和免疫荧光技术检测SH-SY5Y细胞中Ykt6的蛋白表达情况,采用RT-PCR技术检测SH-SY5Y细胞中Ykt6的mRNA水平。（2）以C57BL/6J小鼠为研究对象,利用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）、鱼藤酮以及过表达突变α-突触核蛋白（α-synuclein,α-syn）（A53T）建立帕金森病体内模型,通过转棒实验、平衡木实验和爬杆实验评估小鼠运动能力。采用Western blot检测小鼠纹状体和黑质中Ykt6和酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）蛋白表达情况。（3）利用siRNA敲低SH-SY5Y细胞中的Ykt6,通过Western blot验证敲低效率。通过MTT法检测细胞活力、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）试剂盒检测细胞膜完整性、流式细胞术检测细胞凋亡率、Western blot法检测凋亡相关蛋白cleaved-caspas3的表达,评估细胞凋亡情况。采用RT-PCR法以及Western blot对α-syn的转录水平及蛋白水平进行探究。通过Western blot检测溶酶体膜融合蛋白（Lysosomal membrane-associated proteins1,Lamp1）的蛋白变化,利用Lyso-Tracker Red（LYT）对溶酶体进行荧光染色,评估溶酶体损伤情况。（4）通过Western blot和免疫荧光技术检测帕金森病模型中Lamp1的表达。转染siYkt6后使用MPP+造模,利用Western blot法检测α-syn、Lamp1、组织蛋白酶 D（cathepsin D,CTSD）、自噬相关蛋白（Microtubule-associated protein-light chain 3,LC3）以及 p62 的表达。利用吖啶橙（Acridine Orange,AO）染色,检测细胞内酸性囊泡。提取核蛋白检测核转录因子EB（Transcription Factor EB,TFEB）的表达。通过质粒,在SH-SY5Y细胞中过表达Ykt6,检测Lamp1、α-syn、LC3及TFEB表达情况。结果:（1）MPP+、鱼藤酮处理SH-SY5Y细胞可显著降低Ykt6蛋白及mRNA水平。在MPTP、鱼藤酮以及过表达A53T动物模型中,Ykt6的蛋白表达下降。（2）敲低Ykt6降低SH-SY5Y细胞活力,增加LDH的释放水平,增加SH-SY5Y细胞凋亡率,增加cleaved-caspase3的表达。Ykt6的缺失不影响细胞中α-syn的转录水平,但是会使α-syn蛋白积累。敲低Ykt6降低Lamp1蛋白表达,减弱溶酶体荧光强度。（3）在敲低Ykt6的基础上,给予MPP+处理SH-SY5Y细胞,α-syn进一步累积,细胞中Lamp1、mCTSD的蛋白表达降低,溶酶体荧光强度减弱,p62蛋白表达增加,细胞中酸性囊泡数量减少,细胞核中TFEB含量降低。Ykt6在MPP+模型中增加Lamp1蛋白表达,减少α-syn蓄积,提高LC3水平,促进TFEB在细胞核中的表达。结论:在帕金森病模型中,Ykt6表达下降。Ykt6的缺失诱导细胞损伤,在PD模型中Ykt6表达下调减弱溶酶体功能,抑制自噬。Ykt6可上调Lamp1及TFEB的表达,从而恢复自噬-溶酶体通路。