【摘 要】
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奶牛附红细胞体病是一种日益受到人们关注的人畜共患病，病原是牛温氏附红细胞体。该病近年来给我国养牛业造成了较严重的经济损失。针对目前国内还尚未在分子水平上证实该病原
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奶牛附红细胞体病是一种日益受到人们关注的人畜共患病，病原是牛温氏附红细胞体。该病近年来给我国养牛业造成了较严重的经济损失。针对目前国内还尚未在分子水平上证实该病原的存在，对其分类学地位不清楚及镜检作为检测该病普遍采用的方法存在许多不足等情况。本文对奶牛附红细胞体的16SrRNA基因进行了克隆、测序，并依此建立系统发肓进化树，旨在从分子水平上确定其分类学地位。并且根据所得16SrRNA基因序列设计引物，建立了奶牛感染附红细胞体的PCR诊断方法。 本研究利用原核生物16SrRNA基因通用引物27F和1492R对分离纯化的疑似奶牛附红细胞体进行16SrRNA基因的PCR扩增及克隆测序。测序结果表明，目的片段长度为1439bp，其核苷酸序列与国外已发表的牛温氏附红细胞体(E．wenyoni)的16SrRNA基因片段同源性高达97.1％，暂称为中国广西株(E．wenyoni-CGX)；系统发育进化树显示，E．wenyoni-CGX和其它血营养菌在系统进化关系上组成了一个大的进化分支，与支原体科、支原体属的病原最接近(75％)，而与立克次氏体科的病原较远(55％)。分析结果支持了Neimark等和Messick等提出的将这类血营养菌划归入支原体科、支原体属的建议。 同时，根据测序得到的奶牛附红细胞体16SrRNA基因序列，设计一对种
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