富血小板纤维蛋白复合异种骨修复兔牙槽骨缺损的实验研究

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目的:通过建立兔下颌骨缺损模型,并即可植入钛螺纹钉、异种骨复合富血小板纤维蛋白以及异种骨,探索在种植区骨缺损处放置不同的植入物以及不同时间段对骨缺损愈合的影响。  方法:选用健康的新西兰大白兔12只(5-6月龄,体重2.5-3Kg,雌雄不限),耳中动脉取血5ml,离心10分钟(3000r/min),获取富血小板纤维蛋白,静置后备用。全身麻醉后在兔双侧下颌骨上缘做约5×4×3mm的缺损,缺损后缘位于颏孔前4mm处,其下缘与颏孔平齐。自缺损区近远中壁制备一直径约1.5mm,深3.5mm的种植窝,将种植体植入。  随机把实验动物分为三组,每组4只动物。第一组:实验组,将异种骨复合富血小板纤维蛋白(PRF-XB)植入右侧骨缺损处;对照组,左侧骨缺损处单独植入异种骨(XB),术后4周处死;  第二组右侧骨缺损处植入异种骨复合富血小板纤维蛋白(PRF-XB),左侧骨缺损处单独植入异种骨(XB),术后8周处死;  第三组右侧骨缺损处植入异种骨复合富血小板纤维蛋白(PRF-XB),左侧骨缺损处单独植入异种骨(XB),术后12周处死。  将动物处死后,取其下颌骨,沿种植体近远中两侧6mm锯断下颌骨,获取含有骨缺损和种植体的颌骨标本。根据动物处死时间的不同分为以下三组:A组:下颌骨右侧缺损处植入异种骨复合富血小板纤维蛋白(PRF-XB);下颌骨左侧缺损处单独植入异种骨(XB),术后4周处死。B组:右侧骨缺损处植入异种骨复合富血小板纤维蛋白(PRF-XB),左侧骨缺损处单独植入异种骨(XB),术后8周处死;C组:右侧骨缺损处植入异种骨复合富血小板纤维蛋白(PRF-XB),左侧骨缺损处单独植入异种骨(XB),术后12周处死。将所得标本置于10%中性福尔马林溶液中固定48小时。观察术区骨缺损的愈合程度及新生骨生成的情况,同时通过游标卡尺测量缺损区新生骨生长的宽度和高度的数值,并通过影像学测定CT值来分别比较缺损区的变化。利用SPSS13.0统计分析软件对数据做统计学处理。  结果:  1、大体观察  1.1术后4周:实验组缺损区内骨粉颗粒模糊不清,PRF膜已吸收,动物下颌骨缺损区与移植材料结合较为稳定,新生骨已生成,骨质较为坚硬,但硬度低于成熟骨质,并且与临界的正常下颌骨质界线模糊,有骨痂向缺损区中央延伸,骨端有大量纤维组织成分形成,并与骨组织粘连;对照组表面骨粉颗粒有少量存在,缺损区以纤维组织包裹为主,有少量新生骨生成并且出现了向缺损区中心延伸的趋势。但是数量相对于实验组偏少,骨缺损区表面质地较同期PRF组坚硬度略低。  1.2术后8周:实验组的骨缺损表面不见骨颗粒,已完全被骨痂所替代,新生骨与临界正常下颌骨质界线难以明显辨别,基本与正常骨组织一致,骨质表面质地如同成熟骨;对照组骨痂明显的增多,形成的缺损区也被骨痂所覆盖,骨颗粒基本完全吸收但仍可见少量缺损区,仍有少量纤维组织存在,新生骨痂与动物下颌骨骨界线有模糊界限,且骨质较疏松,中心骨密度小于表层骨密度。  1.3术后12周:实验组新生骨成熟,与周围骨组织结合界限不清,未见明显差异,对照组新生骨密度较正常骨低,界限难以区分。  术后各时期,缺损周围软组织未见任何化脓感染等症状。各组骨缺损处均基本保持下颌骨基本外形弧度,种植钉未有脱落。  利用游标卡尺对实验组与对照组的下颌骨缺损处的宽度进行测量,应用spss13.0软件,运用统计学分析,进行方差分析(P<0.05为标准),比较它们之间是否存在明显差异。  实验研究发现,在术后的第4、8周,两侧下颌骨缺损处新生骨宽度做比较,实验组宽度增长均大于对照组,并且具有统计学意义,有显著性差异(P<0.05)。但在第12周时,两者的缺损处宽度增长相差不明显,无统计学差异(P>0.05)。总体样本比较实验组的宽度增长要高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。而相同材料不同时间段的比较则没有统计学意义。  通过对下颌骨缺损处的高度进行测量,比较对照组与实验组两组之间的差异性。  术后的第4、8周,通过对两侧下颌骨缺损处新生骨高度的比较发现,实验组均高于对照组,具有统计学意义(P<0.05)。但在术后12周时,两组缺损处高度相差不大,无统计学差异,(P>0.05)。总体样本比较,实验组的增长高度要高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。而相同材料不同时间的比较则没有统计学意义(P>0.05)。  利用CT测量缺损区CT值发现,术后第4、8、12周,实验组、对照组两组之间骨密度值分别具有统计学差异(P<0.05),总样本量间实验组与对照组之间骨密度值具有统计学意义,有显著性差异(P<0.01),而对照组第8周、12周之间具有明显的统计学差异(P<0.05),其余相同材料组不同时间对比无统计学差异(P>0.05)。  结论:  1、富血小板纤维蛋白/异种骨二者联合应用或异种骨单独植入骨缺损区均可促进缺损区的早期愈合。  2、富血小板纤维蛋白/异种骨二者联合促进骨缺损早期愈合和成骨能力的效果优于异种骨单独植入,是良好的复合骨组织工程支架材料。
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