富硒醋酸菌的筛选及其富硒特性研究

来源 :山西大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:sdrb_123456
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硒具有诸多对生物体有益的功能和作用已被得到广泛的认可。许多种硒制剂来源也不尽相同,且有研究表明,硒源的毒性为:硒代蛋氨酸>亚硒酸钠>生物硒>纳米红色元素硒,而且它们的功效排列恰好与之相反。有研究表明,醋酸杆菌(Acetobacter Balch)富集的硒很可能正是纳米红色元素硒。所以,醋酸杆菌制备的生物硒具有广阔的发展前景,它的功效与作用将会受到世人的青睐和肯定。首先对醋酸杆菌进行耐硒筛选,采用梯度稀释平板法并重复试验,得出耐受亚硒酸钠浓度最大可达135mg/L,耐硒代蛋氨酸最大为70mg/L。所以亚硒酸钠是更合适的硒源。采用Plackett-Burman设计法设计主要因素筛选试验,Minitab16破解版设计响应面法试验,固定接种生物量比例法设计复合菌株富硒试验。采用透析、消化和氢化物火焰原子吸收法测定菌体当中的硒含量。主要因素筛选试验中,影响最终生物硒含量的九个因素的显著性顺序为:亚硒酸钠添加量>培养时间>初始PH值>培养温度>乙醇添加量>葡萄糖添加量>装液量>接种量>NaCl添加量。单因素试验中,醋酸杆菌合成生物硒含量随着各因素的增加或上升,均大体呈现先增后降的趋势,其中以分别以90mg/L天的培养时间,以30℃的培养温度,以初始PH值6.5,获得了生物硒含量最大值。响应面实验中,获得合成生物硒的优化条件为:加硒量(X1)为75.62mg/L,初始PH值(X2)为5.53,培养温度(X3)为32.32℃,预测响应值为212.604ug/L,验证实验结果与预测值接近。复合菌株实验中,酿酒酵母D245和醋酸杆菌的混合菌株合成生物硒能力最强,达491.20μg/L。最佳接种生物量之比为酿酒酵母D245:醋酸杆菌=1:4。综上所述,本文探索了醋酸杆菌合成生物硒的发酵条件,建立了醋酸杆菌吸收转化合成硒的新工艺,设计出一种微生物硒的新产品和混合菌株方案,为醋酸杆菌生物硒制剂或功能性食品的研发、生产和推广应用奠定了一个好的基础。
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