黑点裸胸鳝的染色体核型与微卫星研究

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黑点裸胸鳝(Gymnothorax melanospilus)是裸胸鳝属(Gymnothorax)鱼类的一种。裸胸鳝属鱼类隶属于硬骨鱼纲(Osteichthyes)鳗鲡总目(Anguillomorpha)鳗鲡目(Anguilliformes)海鳝科(Muraenidas)。据记录,世界上有裸胸鳝鱼类200余种,我国已记录有33种。由于裸胸鳝形态分类上较为混杂,易造成种类鉴定的错乱,为了对裸胸鳝属的种类进行分类鉴别,人们已开始从细胞遗传学和分子遗传学上进行研究。目前,对于该属鱼类从细胞学上已经开展了染色体研究,从分子遗传学上开展了对细胞色素B、线粒体DNA的研究,并取得了一定的研究成果。   本研究在前人的基础上对黑点裸胸鳝的染色体和微卫星点位做了初步的研究,并建立起针对裸胸鳝的染色体制备的技术体系,并成功地将微卫星技术应用到对黑点裸胸鳝的研究中。为研究裸胸鳝的染色体、基因定位、遗传图谱的构建以及系统进化等遗传学问题奠定了基础。   本论文以黑点裸胸鳝的肾细胞为原料,制备了清晰、形态完好的染色体,并进行了染色体核型的初步研究,得出黑点裸胸鳝的染色体核型为:2N=42=10m+6sm+26t。NF=58。   首次研究了裸胸鳝属鱼类的微卫星基因,以黑点裸胸鳝血基因组DNA为原料,经HaeIII+Dra I双酶切后连入T-载体克隆。构建小片段基因组文库,得573个克隆。以通用引物M13+/-与重复序列引物(CA)7、(CT)7对文库进行筛选,得到27个可能含微卫星序列克隆,进行序列测定,获得21个微卫星核心序列,设计引物17对,并对它们的适用性进行了验证。
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