产紫杉醇黑曲霉红豆杉亚种HD86-9发酵产物的分析

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紫杉醇作为抗癌抗肿瘤药物,已受到各国研究者的广泛研究。紫杉醇的来源主要有从植物组织中分离提取、化学全合成和半合成。目前,市面销售的紫杉醇主要来源于红豆杉植物提取,但这种生产方法由于红豆杉树生长周期长,并不利于大规模生产。对于紫杉烷类化合物及前体物的研究不断深入,内生真菌生物发酵合成紫杉烷化合物及紫杉醇优势显著,已成为国内外研究者关注的重点。本试验以产紫杉醇菌株Aspergillus niger subsp.taxi黑曲霉红豆杉亚种HD86-9为出发菌株,通过生物反应器对其进行生物发酵,发酵结束后,发酵液和菌体分别通过乙酸乙酯:甲醇(V:V=1:1)进行萃取,减压蒸馏,浓缩得到浸膏;之后,将浸膏利用正相色谱、反相色谱、高效液相色谱、重结晶技术和质谱及核磁对代谢产物进行分离、纯化和鉴定。试验结果表明从菌株HD86-9发酵液中分离得到4个化合物,经1H-NMR、13C-NMR、MS分析,分别为10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetyl-baccatin Ⅲ)、巴卡亭Ⅲ(BaccatinⅢ)、紫杉醇(taxol)、三尖杉宁碱(Cephalomannine)。本试验通过对内生真菌生物发酵代谢产物进行分离纯化获得紫杉醇及其生物合成的前体物质,为通过化学修饰或微生物转化获得紫杉醇,即化学半合成法合成紫杉醇奠定了基础。此外,本试验所采用的分离纯化技术操作流程简单、分离效果显著、溶剂用量小,为萜类化合物的分离纯化提供了有益的参考。
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