新疆棉花苗期根腐类病害生防细菌的筛选、鉴定与评价

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新疆棉花苗期根腐类病害主要以棉花立枯病和红腐病发生为主,其中立枯病的病原为立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani Kühn),棉花红腐病的致病菌为拟轮枝镰孢霉(Fusarium verticillioides(Sacc.)Nirenberg)。筛选出针对此两种致病菌具有较强拮抗作用的生防细菌,为此类病害的生物防治奠定基础。采用平板对峙法测定田间分离的菌株和实验室多年保存菌株的抑菌能力大小,并对其培养条件、田间防治效果等进行研究,筛选出能有效防治棉花苗期根腐类病害的生防细菌,为新疆棉花产业的绿色发展提供技术保障。具体研究结果如下:1.棉花苗期根腐类病害生防细菌筛选平板对峙法测定菌株A178、L18-1、TWt34、UB17-1、HWt34、LD19-1对立枯丝核菌(R.solani)的抑菌率分别为 80.56%、80.00%、73.05%、80.83%、72.22%,其中菌株A178、L18-1、UB17-1具有强抑菌能力,抑菌率均在80.00%以上;菌株TWt34、HWt34的抑菌率在70.00%以上;菌株A178、L18-1、TWt34、UB17-1、HWt34对立枯丝核菌(R.solani)的抑菌能力显着高于其它生防细菌。菌株A178、L18-1、TWt34、UB17-1、HWt34对拟轮枝镰孢霉(F verticilliodes)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)及大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)抑菌率均在70%以上。通过对抑菌带、抑菌率的综合比较,菌株A178、L18-1、TWt34、UB17-1、HWt34对棉花苗期根腐类病原菌有着较强的抑菌能力。2.5株生防细菌的分类鉴定对生防细菌A178、L18-1、TWt34、UB17-1、HWt34分别进行16S rDNA基因序列与gyrA基因序列测序和生理生化鉴定,菌株UB17-1、L18-1、A178确定为Bacillus velezensis,生防菌株 HWt34 和 TWt34 确定为Bacillus mojavensis。3.生防细菌对棉花苗期根腐类病害的防治效果盆栽实验表明,菌株UB17-1 10-2发酵液和TWt34 10-2发酵液浸种及20%甲枯·福美双种衣剂处理对棉花苗期根腐类病害的防效分别为90.80%、90.18%、90.80%;田间实验表明,UB17-1 10-2发酵液和TWt34 10-2发酵液浸种处理的防治效果较好,与生产中常用的20%甲枯·福美双种衣剂包衣处理效果相当,防效分别为86.17%、85.64%、86.70%。4.生防细菌培养条件优化通过正交实验设计对贝莱斯芽胞杆菌液体培养基营养条件和发酵条件进行研究、优化,以对立枯丝核菌、拟轮枝镰孢霉的抑菌率为指标。确定营养条件最优组合为蔗糖1%,酵母浸粉0.5%,磷酸氢二钾0.2%。发酵条件以pH值为6.5,转速135 r/min,接种量为1%,装液量为150 ml,发酵温度32℃,发酵时间72 h的发酵液对立枯丝核菌抑菌效果最优;pH值为6.5,转速120 r/min,接种量3%,装液量为200 ml,发酵温度32℃,发酵时间72h的发酵液对拟轮枝镰孢霉的抑菌效果最优。
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