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2型糖尿病的发病机制尚未研究清楚,但研究者认为胰岛素抵抗是其重要的机制。近来研究表明,一些长链非编码RNA(lncRNA)与糖尿病的发生发展过程有关。脂肪组织的慢性炎症是肥胖相关的胰岛素抵抗和2型糖尿病的中心环节。lncRNA与炎性疾病的发生、促炎因子的表达有关,并能激活炎性相关信号通路;固有免疫受体,如NOD1,也在固有免疫反应和炎症中发挥着重要作用。近期有研究表明,TLR4激动剂脂多糖(LPS)诱导的lncRNA Mirt 2,抑制NF-?B和MAPK信号通路,从而对炎症有负性调控作用。所以我们猜测lncRNA也可能通过调控免疫受体NOD1介导的炎症反应,在脂肪细胞胰岛素抵抗的过程中发挥作用。在本课题中,首先把3T3-L1小鼠前脂肪细胞诱导为成熟脂肪细胞,通过NO1受体的激动剂Tri-DAP来诱导小鼠成熟脂肪细胞产生慢性炎症状态后,应用第二代高通量测序技术,研究lncRNA在Tri-DAP处理的脂肪细胞中差异表达谱,进而鉴定出胰岛素抵抗相关的lncRNA。最后,应用转染技术敲除胰岛素抵抗脂肪细胞中显著上调的lncRNA,研究其对炎症状态的影响。目的:研究lncRNA在Tri-DAP诱导的小鼠脂肪细胞与对照组中表达谱的差异特征并验证差异表达的lnc TINCR参与Tri-DAP诱导的炎症反应介导脂肪细胞胰岛素抵抗的机制。方法:本研究以小鼠3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,给予10μg/ml胰岛素、1μM地塞米松、0.5 mM 1-甲基-3-异丁基黄嘌呤(IBMX)诱导分化,油红O染色观察脂肪细胞分化程度。把3T3-L1脂肪细胞随机分为实验组、对照组,实验组采用Tri-DAP刺激构建膜岛素抵抗模型,RNA-Seq检测Tri-DAP刺激组3T3-L1细胞中lncRNA的异常表达,对差异表达的lncRNA进行GO分析和KEGG通路分析。Real-time PCR验证Tri-DAP刺激前后,上调的lncTINCR和炎症因子IL-6、TNF-α、CXCL1及通路调节因子RIPK2表达。Real-time PCR及ELISA实验检测siRNA敲减lnc TINCR后,在Tri-DAP诱导下对炎症因子IL-6、TNF-α、CXCL1及通路调节因子RIPK2表达的影响。结果:二代高通量测序发现,与对照组比较,免疫受体NOD1激活的小鼠脂肪细胞组有81条lncRNA和167条mRNA表达显著升高(P<0.05);78条lncRNA和82条mRNA表达显著下降(P<0.05)。我们将上调最明显的lncRNA,NONMMU T038418.2,命名为lnc TINCR(Tri-DAP-inducible non-protein coding RNA)。Real-ti me PCR显示Tri-DAP能够诱导lnc TINCR高表达,同时炎症因子IL-6、TNF-α、CXCL1和RIPK2的mRNA水平显著增加。用siRNA沉默lnc TINCR后,Tri-DAP诱导的炎症因子IL-6、TNF-α、CXCL1和RIPK2的mRNA和蛋白水平表达下降。结论:长链非编码RNA表达谱在小鼠正常脂肪细胞和Tri-DAP处理的小鼠脂肪细胞中呈差异表达,差异表达显著的lnc TINCR可能是NOD1/RIPK2/NF-κB信号通路介导脂肪细胞免疫炎症的正反馈调控分子,其机制可能是通过促进炎症因子IL-6、TNF-α、CXCL1和RIPK2转录调控实现的。lnc TINCR可能参与调控NOD1信号通路介导免疫炎症诱导的胰岛素抵抗的发生。