【摘 要】
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目的:研究Siglec-15在骨巨细胞瘤(Giant Cell Tumor of Bone,GCTB)组织中的表达,并探讨Siglec-15在GCTB组织中表达与患者临床特征之间的关系。检测Siglec-15在GCTB单核基质细胞(Hs 737.T)表达,通过si RNA靶向沉默Siglec-15基因,观察敲低Siglec-15表达对GCTB单核基质细胞的增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法:收集河北
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目的:研究Siglec-15在骨巨细胞瘤(Giant Cell Tumor of Bone,GCTB)组织中的表达,并探讨Siglec-15在GCTB组织中表达与患者临床特征之间的关系。检测Siglec-15在GCTB单核基质细胞(Hs 737.T)表达,通过si RNA靶向沉默Siglec-15基因,观察敲低Siglec-15表达对GCTB单核基质细胞的增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法:收集河北医科大学第三医院病理科2012年1月1日至2017年12月31日GCTB肿瘤组织切片标本56例。通过免疫组织化学染色检测Siglec-15在GCTB组织中的表达,并分析Siglec-15表达与患者性别、年龄、位置、肿瘤大小、Companacci’s分期和肿瘤复发等临床特征的关系。通过免疫荧光染色和RT-PCR测定Siglec-15在Hs 737.T细胞中的表达位置和表达水平。通过Siglec-15 si RNA沉默Hs 737.T细胞的Siglec-15基因表达。通过RT-PCR和Western Blot分别测定Siglec-15在基因和蛋白质水平的沉默效率。通过增殖、克隆形成、划痕和Transwell等实验测定Siglec-15基因表达降低对Hs 737.T细胞的增殖、迁移、侵袭能力的影响。结果:免疫组织化学染色显示,Siglec-15阳性染色主要存在GCTB组织细胞的细胞质、细胞膜中。在56例切片样本中,其中51例表达Siglec-15阳性(91.07%)。另外,Siglec-15表达与Companacci’s分期、肿瘤复发之间差异有显著性(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤定位和肿瘤大小之间差异无显著性(P>0.05)。免疫荧光染色结果显示Siglec-15在Hs 737.T细胞质表达;RT-PCR显示Siglec-15 m RNA在Hs 737.T细胞的表达量(Siglec-15/β-actin)为1.636±0.012,属于高表达。RT-PCR证明了si RNA组的Hs 737.T细胞表达的Siglec-15基因明显低于阴性对照组。另外,Western Blot证明了si RNA组的Hs 737.T细胞的Siglec-15蛋白的表达明显低于阴性对照组。体外实验显示,si RNA组Hs 737.T细胞的增殖、迁移、侵袭功能均明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论:Siglec-15在GCTB组织中高表达,其表达水平在肿瘤Companacci’s分期、肿瘤复发中差异有显著性。Siglec-15在Hs 737.T细胞中高表达。Siglec-15基因表达降低可使Hs 737.T细胞的增殖、迁移、侵袭功能明显下降。这些结果提示,Siglec-15表达可能在GCTB生长、侵袭、转移中扮演重要角色,可能成为GCTB患者临床诊断、治疗和预后判断的新指标。
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